Статья на тему: "Особенности диагностики вирусной диареи крупного рогатого скота"

Особенности диагностики вирусной диареи крупного рогатого скота

Выделение и идентификация вируса ВД-БС КРС в культуре клеток остается «золотым стандартом» диагностики болезни и в настоящее время. Вирус хорошо реплицируется в первичных и перевиваемых клеточных линиях нескольких видов животных. Для его выделения от больных животных используют цельную кровь [190], сыворотку крови и тампонные пробы носовых и влагалищных выделений [18]. Отбирают от павших и вынужденно убитых животных, абортированных плодов лимфоидные органы (селезенку, участки пейеровых бляшек, брыжеечные лимфатические узлы и тимус). У ПИ животных, как правило, концентрация вируса настолько высока, что любые пробы биологического материала от них подходят для изоляции вируса. Размножение вируса ВД-БС КРС в культуре клеток не всегда вызывает видимый цитопатический эффект, в 70-90% его изоляты имеют НЦП биотип. Одним из условий эффективной диагностики ВД-БС КРС является использование в работе культуры клеток, свободной от персистентного инфицирования НЦП биотипом вируса. Поэтому все культуры клеток должны быть протестированы на присутствие НЦП биотипа вируса ВД-БС КРС. Для этих целей обычно применяют иммунофлуоресцентный метод, иммунопероксидазное окрашивание монослоя культуры клеток, непрямой ИФА, ОТ-ПЦР. Обнаружение антигена вируса ВД-БС КРС более быстрый и дешевый метод диагностики, чем выделение вируса в культуре клеток, но менее чувствительный. Для этого применяют следующие методы: ИФА и иммунологическое окрашивание свежих, фиксированных формалином или парафиновых срезов тканей. Широкое применение в качестве скрининг - теста в некоторых диагностических лабораториях нашел метод иммуногистохимического окрашивания ушных выщипов. Кроме того, разработано несколько методов гибридизации нуклеиновой кислоты для прямого обнаружения РНК вируса в различных образцах биологического материала [64, 92, 113, 186], но они не нашли широкого применения в диагностических лабораториях. 19 В последние годы широкое применение в диагностике ВД-БС КРС находит метод ОТ-ПЦР. Для количественной оценки РНК вируса в образце разработана ОТ-ПЦР в режиме реального времени [149]. Для выявления антител к вирусу ВД-БС КРС применяют метод ИФА или реакцию нейтрализации (РН). При помощи РН определяют уровни вируснейтрализующих антител, сероконверсию к вирусу исследованием парных проб сыворотки крови, отобранных от животных с интервалом 30 дней.

При разработке противоэпизоотических мероприятий при ВД-БС КРС основное внимание уделяют выявлению и удалению из стада ПИ животных, выбору вакцин и планированию вакцинации, недопущению инфицированных животных в стадо [136]. Большое значение имеет формирование напряженного иммунитета в определенной популяции животных [25]. В стадах, где присутствует вирус ВД-БС КРС, необходимо регулярно проводить мероприятия по выявлению и выбраковке ПИ животных, поскольку они являются основным источником инфекции. Следует проверять всех вновь прибывших животных на наличие вируса во время карантина. В настоящее время разработаны как инактивированные, так и живые модифицированные вакцины против ВД-БС КРС. Основная цель применения вакцин заключается в осуществлении защиты от острой инфекции телок и трансплацентарной инфекции плодов, снижении инцидентности абортов, распространения вируса среди животных и повышении иммунного статуса стада [21]. Вакцинация не является универсальным средством в борьбе с ВД-БС КРС. Из-за антигенной вариабельности вируса, вакцины должны обладать широкой перекрестной защитой от инфицирования разными вирусными штаммами, что не всегда осуществимо. Это может приводить к прорывам иммунитета и недостаточной защите плода. Применение вакцин не позволяет устранить персистентную 20 инфекцию вирусом ВД-БС КРС в стаде. Эффективность разрабатываемых вакцин принято изучать в клинических испытаниях с однократным заражением экспериментальных животных полевыми штаммами вируса. В реальных условиях животные находятся в контакте с вирусоносителями длительное время, при этом эффективность вакцин снижается, что подтверждено в экспериментальных исследованиях [187]. Кроме того, на эффективность применения вакцин влияют условия содержания животных, различные виды стресса, индивидуальные различия в иммунном ответе, возраст, стельность, наличие сопутствующих заболеваний [15]. Между вакцинацией и выработкой иммунитета существует период времени, когда еще не выработался иммунный ответ и животное является восприимчивым к инфицированию. Использование химиопрепаратов могло бы защитить животное в этот период времени. Однако в настоящее время не разработано эффективной химиотерапии для лечения и профилактики ВД-БС КРС