Биологическая активность экстрактов пчелиного подмора

Министерство образования и науки Республики Башкортостан

Муниципальное автономное общеобразовательное учреждение

средняя общеобразовательная школа села Красный Ключ

муниципального района Нуримановский район Республики Башкортостан

Тема «БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ПЧЕЛИНОГО»

Исследовательская работа по химии

Выполнила:

Муслимова Аделина

МБОУ Байгильдинский сельский лицей им. Исмагилова Р.С., 8 класс

Руководитель: Масалимова Алия Мидхатовна, учитель химии

с. Красный Ключ – 2022 г.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ 3

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 5

1.1.Характеристика пчелиного подмора 5

1.2.Свойства пчелиного подмора 6

1.3.Химический состав 7

1.4 Ферменты пчелиного подмора 11

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 14

2.1 Характеристика объекта исследования 14

2.2 Определение белка в апиэкстракте 14

2.3 Обнаружение каталазы в экстракте помора 15

2.4 Обнаружение амилазы в подморе 15

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ 16

3.1. Состава пчелиного подмора 16

3.2 Полученный экстракт пчелиного подмора 17

3.3 Белок в пчелином подморе 17

3.4 Активность каталазы 18

3.5 Амилаза и крахмал в подморе 19

ЗАКЛЮЧЕНИЕ 20

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ И ЛИТЕРАТУРЫ 22

ВВЕДЕНИЕ

Разведением пчел человек занимается издревле. И не только потому, что пчелы, опыляя растения, повышают их урожайность, улучшают качество получаемых семян, плодов и ягод. Пчеловодство дает замечательные по своим вкусовым, лечебным и профилактическим свойствам продукты.

В нашей стране уделяется большое внимание заготовке и использованию продуктов пчеловодства: созданы крупные пчеловодческие межхозяйственные комплексы, значительно выросли объемы производства меда, пыльцы, прополиса, маточного молочка. Были выполнены многочисленные исследования по изучению биологически активных веществ пыльцы (обножки) медоносных растений, разработан способ обогащения пчелиного меда биологически активными соединениями перспективных видов плодовых растений.

Особое место среди продуктов пчеловодства занимает широко используемый в народной медицине продукт, называемый пчелиным подмором.О его удивительном целебном свойстве знают немногие, да и те зачастую считают его чем-то вроде знахарского снадобья. Лишь совсем недавно ученые доказали, что подмор, как и все биологически активные продукты пчеловодства, - богатейшая природная кладовая уникальных целебных веществ.

Пчелиный подмор - это тела пчел, погибших естественной смертью на протяжении зимнего периода жизни пчелиной семьи, которые вместе с частицами воска скапливаются на дне улья. Поскольку на поверхности тел и в зобе пчел имеется цветочная пыльца, пчелиный подмор является комбинированным препаратом, включающим, как животные, так и растительные компоненты. Кроме того, трупы пчел не используют в нативном состоянии – в процессе экстракции биологически активные компоненты отделяются от хитинового покрова пчел, высокомолекулярных протеинов и углеводов, частиц воска и клетчатки.

Препараты пчелиного подмора, включают в себя, хитозан, меланиновые комплексы, гепароиды, аминокислоты, пептиды, пчелиный яд, сам по себе являющийся исключительно сложным комплексом, и некоторые другие вещества различной природы. Они восстанавливают биологическое равновесие путём очищения организма и регуляции обменных процессов, стимулируют и нормализуют иммунные реакции, обладают фото- и радиопротекторными свойствами, повышают устойчивость организма к неблагоприятным внешним воздействиям. Благодаря антибактериальным и противовирусным свойствам, они угнетают активность некоторых микроорганизмов, защищая организм от вирусных инфекций. Антиоксидантные свойства подмора позволяют применять его для нейтрализации токсичных соединений различной природы, предотвращения мутаций на клеточном уровне, замедления процессов старения организма.

Таким образом цель нашей работы заключалась в изучении физико – химического состава и исследования биологической активности экстрактов пчелиного подмора.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи:

1. Поиск и анализ научной литературы

2. Изучение методологии проведения практической части данной работы.

3. Определение активности ферментов.

4. Обнаружение белка в пчелином подморе

Объектом исследования данной работы был, изначально воздушно – сухой пчелиный подмор, собранный осенью 2021 году в частной пасеке Нуримановского района. Подмор был представлен преимущественно рабочими пчелами.Для определения биологической активности был получен экстракт (Апиэкстракт) пчелиного подмора.

Работа была выполнена на базе Муниципального бюджетного общеобразовательного учреждения, лицея села Байгильдино им. Исмагилова Р.С. и состоит введения, литературного обзора и практической части.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
   1. Характеристика пчелиного подмора

Пчелиный подмор – это пчелы, погибшие в зимний и весенний периоды в результате естественного старения, а также от паразитов и хищников, незаразных и заразных болезней и других неблагоприятных условий зимовки пчел. Максимальное количество пчелиного подмора на пасеке бывает во время весенней ревизии семей пчел, именно в это время его удобнее всего заготавливать [4]. Следует иметь в виду, что использовать можно не весь подмор, а только тот, который хорошо сохранился, то есть достаточно свежий, сухой, без плесени и признаков разложения. Если в течение зимовки подмор с мусором периодически выгребались из ульев, то к весенней ревизии в них остается свежий и чистый.

Пчелиный подмор бывает трех видов: зимний, выметаемый из ульев во время зимовки пчел, весенний, собираемый возле ульев, и трупики пчел, оставшиеся после лечения пчелоужалением.

В настоящее время описано более 10 препаратов, полученных из тел пчел. В качестве сырья можно использовать тела насекомых, погибших в результате физиологического старения, голода, холода, недостатка воды и воздуха, механических факторов. Подмор, образовавшийся в результате инфекционных и паразитарных заболеваний или отравления экологическими ядами, не пригоден для лечения и должен уничтожаться.

Для оздоровительных целей пчелиный подмор может использоваться как в натуральном виде (порошок из тел пчел и трутней), так и смешанный с экстрагентом (вода, спирт, масло, мед и пр.). Наиболее часто используемые формы: отвары, распары, спиртовые настойки и экстракты, линименты и мази, медовые композиции, а также тела пчел и трутней в жареном и порошкообразном виде. Они могут применяться внутрь, наружно и на слизистые, предназначены для лечебных, профилактических и диетических целей. В настоящее время сообщается о положительных результатах применения пчелиного подмора в лечебных, профилактических и диетических целях (Э.А.Лудянский, А.Ф.Синяков, А.К.Рачков и др.).

1. Свойства пчелиного подмора

В апитерапии пчелиный подмор считается мощным лекарственным средством, апробированным врачами-апитерпевтами начиная с ХIХ века.

Для лечебных целей годиться не любой подмор, а только достаточно свежий, сухой, без плесени и признаков разложения.

Пчелиный подмор используется в форме отвара, распара, линимента, 10 %-ного спиртового экстракта, жареных тел пчел. Препараты пчелиного подмора, включающие кроме хитозана меланин, гепароиды и некоторые другие вещества, восстанавливают биологическое равновесие путем очищения организма и регуляции обменных процессов стимулируют и нормализуют иммунные реакции, повышают устойчивость организма к неблагоприятным внешним воздействиям. Благодаря антибактериальным и противовирусным свойствам они угнетают активность некоторых микроорганизмов, защищая организм от вирусных инфекций.

Антиоксидантные свойства подмора позволяют применять его для нейтрализации токсичных перекисных соединений, предотвращения мутаций на клеточном уровне, замедления процессов старения организма. Благодаря гепатопротекторным свойствам пчелиный подмор снижает нагрузку на печень, служит проверенным средством против лямблий в ней. Препараты пчелиного подмора действуют как кровоочистительное средство. Обладая антитоксическими свойствами, они связывают и выводят из организма токсичные элементы и кишечные токсины. Кроме того, пчелиный подмор используется при лечении мастита и панарициев, при суставных болях и аденоме предстательной, щитовидной железы, импотенции и фригидности. Главное свойство пчелиного подмора — повышение иммунитета. Природные химические соединения обладают менее вредным воздействием на организм, чем синтетические аналоги или химически синтезированные, что определяет возможность их длительного применения для лечения хронических заболеваний и в профилактических целях.

Основным действующим веществом пчелиного подмора является  хитин  и  пчелиный яд.

Об его удивительном целебном свойстве знают немногие, да и те зачастую считают его чем-то вроде знахарского снадобья. Лишь совсем недавно ученые доказали, что подмор, как и все биологически активные продукты пчеловодства, - богатейшая природная кладовая уникальных целебных веществ. Он обладает высоким биоэнергетическим потенциалом и с успехом может использоваться для оздоровления человека. Это нелекарственный препарат, на основе его ещё не разработаны биологически активные добавки, однако эффективность подмора несомненна и подтверждена врачами. Ещё Гален, знаменитый древнеримский врач, употреблял раздавленных в меду пчел при карбункулах, заболевания десен, зубной боли, для облегчения прорезывания зубов у грудных детей, для восстановления роста волос. Писатель Плиний Младший указывал, что зола сожженных пчел, смешанная с маслом, - хорошее средство от многих недугов. Золу, смешанную с мёдом, употребляли при глазных болезнях, для роста и укрепления волос. Пчел, сваренных в меду, использовали при дизентерии. Отвар пчел применяли как мочегонное средство. В английских медицинских книгах XVII века высушенных и истолченных пчел рекомендуется принимать внутрь с молоком при водянке, подагре, ревматизме и как растворитель мочевых камней; пчел в меду - при спазмах и резях в животе, кровавом поносе, для лечения язв, гнойников и мокнущих лишаев.

1. Химический состав

Тело пчелы включает в себя практически все компоненты меда, пыльцы, маточного молочка, прополиса, воска (аминокислоты, минералы, витамины, ферменты, гормоноподобные вещества), которые обладают оздоровительными свойствами.

Сухие мертвые пчелы содержат биологически активные соединения. Препараты пчелиного подмора, включают в себя, кроме хитозана, меланин (азотосодержащий пигмент животного происхождения), а если точнее - меланиновые комплексы, гепароиды, пчелиный яд микро и макроэлементысам по себе являющийся исключительно сложным комплексом, и некоторые другие вещества различной природы. Они восстанавливают биологическое равновесие путём очищения организма и регуляции обменных процессов, стимулируют и нормализуют иммунные реакции, обладают фото- и радиопротекторными свойствами, повышают устойчивость организма к неблагоприятным внешним воздействиям. Благодаря антибактериальным и противовирусным свойствам, они угнетают активность некоторых микроорганизмов, защищая организм от вирусных инфекций. Антиоксидантные свойства подмора позволяют применять его для нейтрализации токсичных соединений различной природы, предотвращения мутаций на клеточном уровне, замедления процессов старения организма.

Главная ценность пчелиного подмора - хитин, а точнее хитозановый комплекс в состав, которого входят глюкозамин, меланин, гепарин, пчелиный яд, уксусная кислота. Эти вещества восстанавливают биологическое равновесие организма благодаря очищению, регуляции обменных процессов, стимуляции иммунной системы. Они угнетают активность многих болезнетворных микроорганизмов, защищают человека от вирусных инфекций.

Хитин  представляет собой линейный полисахарид плохо растворимый в воде и спирте, растворимый в концентрированных неорганических кислотах, концентрированной муравьиной кислоте и некоторых щелочах. Хитин открыл французский учёный H. Вraconnot в 1811 году при исследовании состава грибов. В 1823 году A. Odier выделил хитин из надкрылий насекомых.

Хитозан впервые был получен в 1859 году C. Rouget. Параллельно систематические исследования хитина, хитозана и их производных, а также возможности их применения в 50-е годы XX столетия проводились в России под руководством С.Н. Данилова в Институте высокомолекулярных соединений АН СССР.

Хитозан-меланиновый комплекс, применительно к пчелиному подмору, правильней было бы называть апизан-меланиновым. В промышленных масштабах хитозан получают из морских панцирных, пчелиный же подмор уникален по своим свойствам. Низкомолекулярный хитозанмеланиновый комплекс, полученный из пчелиного подмора, обладает выраженным липотропным действием (связывание жиров, расщепление их), способствует снижению высокого уровня холестерина в крови, что является важным фактором предупреждения атеросклероза, ожирения и их грозный последствий; снимает неприятные ощущения в области сердца, механически очищает кишечник, нормализует его функцию, уменьшает всасывание токсинов, предупреждая тем самым заболевания желудочно-кишечного тракта; действует как профилактическое средство при риске развития диабета.  ХИТОЗАН  способен связывать и выводить радионуклиды и соли тяжелых металлов, усиливает внутрикишечный синтез витаминов В1 , В2 , В3 , РР и фолиевой кислоты, активизирует работу щитовидной железы, ускоряет заживление ожоговой и раневой поверхности без образования рубцов; при нанесении на рану обладает кровоостанавливающим и обезболивающим эффектом.

Гепарин  и гепариноиды - подавляют воспалительные процессы, стабилизируют кровяное давление оказывают целебное действие на систему крови (улучшает кроветворение), состояние сосудов головного мозга и сосудов конечностей при варикозном расширении вен, тромбофлебите.

Гепарин содержится в тучных клетках соединительной ткани и играет исключительно важную роль в поддержании равновесного состояния свертывающей и противосвёртывающей систем крови: Лекарственный препарат гепарин широко применяют при лечении заболеваний, связанных с нарушением микроциркуляции, с патологией крови, печени, сердца, сосудов, почек и пр. Получение его из хитинового покрова пчел - дорогостоящая процедура. Получаемый при этом медикамент дорог и не всем доступен.

Тела погибших пчел использовать гораздо легче и дешевле. Их хитозан или пчелозан - более мощное биологически активное вещество, чем хитозан ракообразных. Уже доказаны его положительная роль в регуляции всех видов обмена веществ (углеводного, белкового, витаминного, минерального, водно-солевого, общеукрепляющее, противовоспалительное, адаптогенное, тонизирующее, регулирующее функцию эндокринной и нервной систем действия.

Считается, что меланин, обладающий радиопротекторными свойствами, способен связывать и выводить токсичные вещества, радиоактивные изотопы и соли тяжёлых металлов. Эксперименты белорусских учёных показали, что одна молекула меланина способна связать 20-30 молекул меди или свинца, которые наносят вред организму. Смею предположить, что при измельчении и экстрагировании пчелиного подмора часть этих минеральных веществ переходит в экстракт. С 1961 года исследованиями хитина, с целью создания противолучевых препаратов, занимался Б. П. Белоусов в Институте биофизики МЗ СССР. На семи видах животных, в том числе на собаках и обезьянах, было показано выраженное противолучевое действие хитозана. Его внутривенное введение животным до облучения в летальных дозах полностью предотвращало их гибель. Введение после облучения увеличивало выживаемость до 45%. 

В медицине, благодаря высокой биологической активности, широкое применение нашли действующие вещества пчелиного яда и гепарина, которые сочетают природные амины (гистамин, дофамин, норадреналин, серотонин, мелитин) и антикоагулянты – вещества предотвращающие свертываемость крови, образование тромбозов.

Пчелиный подмор содержит значительные количества как макро-, так и микроэлементов.

Минеральные вещества, содержащиеся в сухих пчелах, имеют легко усваиваемую для организма человека форму и представлены не только распространенными в природе (таблица 1):

Состав минеральных соединений зависит от породы пчел, среды обитания и кормовой базы.

Таблица 1.

Элемент	Содержание в пчелином подморе, мкг/г
К	5670
Ca	495
Fe	30
Mn	2,94
Zn	68,70
Cu	15,24
Se	0,57
I	4,26
Br	1,30
Ni	0,55
S	2034
Sr	0,41
Cr	3,11
As	0,59
Pb	0,49

Белки – наиболее сложные из азотсодержащих соединений. Их пищевая ценность представлена качественным и количественным составом присутствующим аминокислот.

Таблица 2.

Аминокислота	Содержание, %
Аспарагиновая кислота	22,65
Треонин	12,53
Серин	9,09
Пролин	0,84
Цистин	25,07
Валин	2,51
Метионин	1,27
Изолейцин	1,88
Лейцин	4,95
Тирозин	5,47
Фенилаланин	2,49
Гистидин	4,83
Лизин	4,26
Аргинин	2,15

Аминокислотный состав белка пчелиного подмора представлен на таблице 2. Из данных таблицы, следует, что наибольшее содержание приходится на цистин (25,07%). Аспарагиновая кислота (содержание составляет 22,65%) относится к моноаминодикарбоновым кислотам, играет большую роль в азотистом обмене, в белках находится в виде аспарагина.

Таким образом, пчелиный подмор содержит ряд ценных биологически активных соединений.

1.4 Ферменты пчелиного подмора

Активность каталазы

К классу оксидоредуктаз относят ферменты, катализирующие окислительно–восстановительные реакции. Одним из них является – каталаза. Данный фермент катализирует реакцию разложении перекиси водорода с выделением молекулярного кислорода.

Каталаза - чрезвычайно распространенный фермент как в животном, так и растительном мире. Основной функцией каталазы считается разложение перекиси водорода, которая тормозит большинство ферментных процессов, на молекулярный кислород и воду.

Летом каталаза максимально активна у молодых пчел в 6-12-дневном возрасте, после чего активность снижается до исходной величины, наблюдаемой у только что родившихся пчел. У пчел осеннего поколения характер возрастной изменчивости фермента несколько иной: примерно с 12-го дня жизни намечается постепенное повышение активности каталазы, которое продолжается с небольшими колебаниями до установления высокого уровня, характерного для зимних пчел.

Характерной особенностью деятельности каталазы живой клетке является их способность образовывать системы (так называемые цепи окислительно–восстановительных ферментов), в которых осуществляется многоступенчатый перенос атомов водорода или электронов от первичного субстрата к конечному акцептору, которым является, как правило, кислород, так что в результате образуется вода.

Другая особенность состоит в том, что, будучи двухкомпонентными ферментами с весьма ограниченным набором активных групп (коферментов), они способны ускорять большое число самых разнообразных окислительно–восстановительных реакций.

Амилаза (диастаза)

Гидролазы – ферменты, осуществляющие разрыв внутримолекулярных связей в субстрате путем присоединения элементов Н₂О, подразделяются на 13 подклассов.

Гидролазы широко представлены ферментами желудочно-кишечного тракта (пепсин, трипсин, липаза, амилаза и другие) и лизосомальными ферментами. Осуществляют распад макромолекул, образуя легко адсорбируемые мономеры.

Амилаза фермент, расщепляющий крахмал до олигосахаридов, относится к ферментам пищеварения. Этому типу относятся амилаза слюнных желез и амилаза поджелудочной железы. Она способна гидролизовать полисахаридную цепь крахмала и других длинноцепочечных углеводов в любом месте. Таким образом, процесс гидролиза ускоряется и приводит к образованию олигосахаридов различной длины. У животных α-амилаза является основным пищеварительным ферментом. 

Диастаза – фермент слюнно-глоточных желез пчелы.
Приставка ди- в названии фермента свидетельствует о том, что фермент состоит из двух компонентов, а именно – альфа-амилазы и бета-амилазы. Каждая из этих амилаз отщепляет от молекулы крахмала разные молекулярные цепочки. 

Гидролиз (расщепление) крахмала амилазами идет по такой схеме: крахмал – декстрины – глюкоза

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Характеристика объекта исследования

Объектом исследования данной работы был, изначально воздушно – сухой пчелиный подмор, собранный осенью 2021 году на частной пасеке Нуримановского района. Подмор был представлен преимущественно рабочими пчелами. Сушку проводили потоком теплого воздуха при комнатной температуре выложив тонким слоем,до влажности 5-6 %, обеспечивающей его крошимость.

Рис. 2.1 Объект исследования – пчелиный подмор

Этапы получение экстракта (апиэкстракта) пчелиного подмора

1. Сушка сырья

2. Измельчение сырья (гомогенизация), проводят для увеличения площади активной поверхности для лучшей экстракции.

3. Экстракция в соотношение 1:5

4. Фильтрация.

2.2 Определение белка в апиэкстракте

1. Ксантопротеиновая реакция (реакция на аминокислоты с бензольными кольцами, фенилаланин тирозин и триптофан).

К экстракту пчелиного подмора прилить концентрированную азотную кислоту. Получившийся раствор осторожно нагреть, и прилить раствор аммиака.

1. Биуретовая реакция основана на взаимодействии слабощелочных растворов белков с раствором сульфата меди (II), в результате которой появляется фиолетово – синяя окраска.

Добавить в пробирку с экстрактом пчелиного подмора несколько капель 10% - го раствора NaOHи 1 каплю 1% -ного раствора CuSO4 и все перемешать.

1. Обнаружение каталазы в экстракте помора

К 4 мл экстракта добавить несколько капель 3%-ногоH2O2. В результате разложения перекиси водорода ферментом выделяются пузырьки кислорода, дающие хорошо заметную пену. Активность фермента оценить в баллах: интенсивное образование пены ^__ 4 балла, умеренное ^__ 3, слабое ^__ 2, очень слабое ^__ 1 балл, отсутствие активности ^__ 0 баллов.

1. Обнаружение амилазы в подморе

· В две пробирки налейте по 10 капель раствора крахмала, подпишите пробирки контрольиопыт;

· В контрольную пробирку налейте 5 капель воды, в опытную – 5 апиэкстракта

· Перемешайте и поставьте в термостат при 37⁰С на 15 мин;

· Затем опытную пробирку разделите пополам, отливая половину содержимого в чистую пробирку;

· В одну пробирку добавьте 1 каплю йода, в другую добавьте 1 каплю сульфата меди и 4 капли гидрооксида меди и нагрейте до кипения (реакция Троммера);

· Аналогичные реакции проведите с контрольной пробиркой;

· Отметьте изменение окраски и данные занесите в таблицу.

1. РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ

В ходе выполнения данного исследования были получены следующие результаты:

1. Выбран объект исследования и изучен механический его состав.

2. Был получен водный экстракт пчелиного подмора.

3. Была проведена работа по обнаружению белка в экстракте;

4. Обнаружены ферменты, а именно каталаза, амилаза

3.1. Состава пчелиного подмора

Сырье представляло собой черно-коричневую массу со специфическим запахом. При детальном рассмотрении через микроскоп были видны целые неразрушенные пчелы и различные части пчел (голова, грудь, ножки, брюшко, крылья и др.).

Пчелиный подмор содержит минимальное количество минеральных веществ, так как кутикула насекомых практически не минерализована. Массу подмора подсушивали при температуре около 35°С, выложив тонким слоем.

Высушенное сырье массой 50 грамм предварительно измельчили в барабанной мельнице (кофемолка) до размера частиц 3-4 мм.

Рис. 3.1 . Пчелиный подмор под микроскопом, при увеличении X40

3.2 Полученный экстракт пчелиного подмора

По общепринятой методике мы получили водный экстракт (апиэкстракт) пчелиного подмора.

Рис. 3.2. Апиэкстракт подмора

1. Белок в пчелином подморе

В исследуемом экстракте подмора была проявлена положительная реакция на белок.

Кантопротеиновая реакция - это метод, который может быть использован для обнаружения присутствия белка, растворимого в растворе, с использованием концентрированной азотной кислоты. Тест дает положительный результат в аминокислотах, несущих ароматические группы, особенно в присутствии тирозина. Если тест положительный, доказательство нейтрализуется щелочью, становясь темно-желтым. Желтый цвет обусловлен ксантопротеиновой кислотой, которая образуется в результате нитрования определенных аминокислот, наиболее распространенными примерами которых являются тирозин и триптофан.^[1] Эта химическая реакция является качественным тестом, определяющим наличие или отсутствие белков.

Рис. 3.3.. Исследуемый экстракт подмора. Слева – до проведения, справа – после проведения ксантопротеиновой реакции

1. Активность каталазы

Важная роль в обмене веществ живых организмов на любых стадиях онтогенетического развития отводиться функционированию фермента каталазы. Роль данного фермента заключается в разложении токсичного перекиси водорода, образующегося в процессе биологического окисления  на воду и молекулярный кислород. Каталаза также является первичным антиоксидантным ферментом, изменение которого может служить показателем устойчивости организмов к стрессам.

Реактивом на обнаружение каталазы является 3 – х % раствор перекиси водорода. При этом в экстракте подмора происходило бурное выделение газа (кислорода), что свидетельствует об активности фермента каталазы.

Рис3.4. . Активность каталазы в подморе

Активность фермента характеризовалась интенсивностью образующейся пены в экстракте и оценивалась в баллах.

Активность	Балл
Интенсивное образование пены	4
Умеренное	3
Слабое	2
Очень слабое	1
Отсуствие активности	0

В проведенном исследовании активность была умеренной.

1. Амилаза и крахмал в подморе

Крахмал относиться к классу сложных углеводов, обладающий высокой энергетической ценностью, а также легкой усвояемостью. Этот полисахарид, проходя по желудочно – кишечному тракту, трансформируется в глюкозу, которая усваивается за 4 часа.

По литературным данным, в пищеварительный тракт пчелы поступает ряд ферментов а также крахмал вместе с пыльцой которую она собирает.

Реактивом, для обнаружения крахмала в данном опыте являлся йод, который при наличии в растворе окрашивает ее в сине – фиолетовый цвет. В данном опыте наблюдалась отрицательная реакция на крахмал. Это можно обьяснить тем, крахмал амилазой в организме пчелы превращается в дисахариды, а потом другими ферментами в моносахариды.

Аналогичная картина наблюдалась при обнаружении фермента амилазы, его активности в экстракте подмора не наблюдалась.

Основная роль амилазы в организме сводиться к расщеплению крахмала, и поэтому можно сделать вывод о том что амилаза полностью израсходавалась в ходе расщепления крахмала на дисахара

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, в экстракте пчелиного подмора, собранного осенью 2021 году на частной пасеке Нуримановского района, была обнаружена активность важных веществ, играющих колоссальную роль в жизнедеятельности организмов и человека.

Приведенные в работе характеристики экстракта пчелиного подмора показывают, что будучи комбинированным препаратом, полученным как из тканей пчелы, так и из объектов растительного происхождения, например цветочной пыльцы, апиэкстракт является ценным источником биологически активных соединений — витаминов, аминокислот и антиоксидантов. В частности, по антиоксидантной активности апиэкстракт не уступает традиционным фармацевтическим препаратам, используемым для этой цели. Для получения апиэкстракта целесообразно при держиваться оптимального количества циклов экстракции, однако очистка исходного сырья и самого экстракта от примесей при водит к снижению его биологической ценности и поэтому нежелательна.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ И ЛИТЕРАТУРЫ

1. Брандфорд А.З., Ивойлова М.М. Активность каталазы ректальных желез // Пчеловодство. 2011. №8. С 18-19

2. Берикашвили З.Н., Боер И.В. Антибактериальная активность экстрактов пчелиного подмора // Вестник КГАУ. — 2009. — № 3.

3. Берикашвили, З.Н. Антибактериальная активность экстрактов пчелиного подмора [Текст] / З.Н. Берикашвили, И.В. Боер // Вестник Краснодарского государственного аграрного университета. - 2009. - № 3. - С. 197-199.

4. Дэвени Т., Герсей Я. Аминокислоты, пептиды, белки. — М.: Мир, 1976. — 368 с.

5. Еськов Е. К. Индивидуальные и социальные адаптации медоносной пчелы. М.:Агропромиздат, 1991. 239 с.

6. Жеребкин М.В. Физиологические показатели зимостойкости пчел и продолжительность зимовки// Апиакта. 1974. №2. С. 65-68

7. Жеребкин М.В. Зимовка пчел. М.: Колос, 1979. 151 с.

8. Лебедев В.И., Билаш Н.Г. Биология пчелы медоносной и пчелиной семьи. М.: Колос, 2006. 255 с.

9. Ляшевская Н.В. Биохимия и молекулярная биология: учебно-методической комплекс. Горно-Алтайск: РИО ГАГУ, 2009. С. 37—38

10. Омаров Ш. М. Апитерапия: продукты пчеловодства в мире медицины. — Ростов н/Д: Феникс, 2009. — 351 с.

11. Павалюк П.П., Мантоптин А.И., Кондратюк Ш.Г. Пчелиные продуктоы в укрепление и поддержание здоровья. Кишинэу: TipografiaCentrală, 2005, 159 с.

12. Смирнова В. ВЖивительная сила пчелиного подмора / В.В. Смирнова// Пчеловодство.-2007.- №4.- с.54-57

13. Фрунзе О.Н., Петухов А.В., Максимов А.Ю. Активность каталазы у пчел летней и осенней генерации // Пчеловодство. 2009. № 2. С.23

14. ХисматуллинаН. З. Апитерапия. — Пермь: Мобиле, 2005. — 296 с.