Микроорганизмы - Исследовательская работа

Министерство образования Республики Беларусь

Отдел по образованию Новополоцкого горисполкома

Государственное учреждение

образования «Лицей г. Новополоцка»

Изучение штаммов микроорганизмов и их воздействие на живые объекты

Автор работы:

учащаяся 10 «Г» класса

Шалахова Анастасия Александровна

Руководитель работы:

Капшуль Жанна Геннадьевна,

учитель биологии

высшей категории

2023

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………………………...	3
ГЛАВА 1. Литературный обзор……………………………………………………..	5
1.1 Выбор штаммов микроорганизмов для исследования………………………...	6
1.2 Метод электронной микроскопии в изучении микрообъектов………………..	6
ГЛАВА 2. Практическая часть………………………………………………………	7
2.1 Общая стратегия выращивания и размножения штаммов……………………	7
2.2 Микроорганизмы на разных этапах эксперимента……………………………..	8
2.3 Влияние боверии на живые объекты……………………………………………	12
2.4 Выращивание растений с использованием микроорганизмов………………..	15
ГЛАВА 3. Результаты и их обсуждение…………………………………………….	16
Заключение……………………………………………………………………………	17
Актуальность и перспективы дальнейшего исследования………………………...	18
Список используемой литературы…………………………………………………..	19
Приложения…………………………………………………………………………..	20

ВВЕДЕНИЕ Мир микроорганизмов необычайно многообразен. Они окружают нас повсюду и являются неотъемлемой частью нашей повседневной жизни. Познать этот мир до конца крайне сложно из-за огромного количества видов, которым он представлен, однако заглянуть в него краешком глаза вполне реально даже для того, кто только начинает свой исследовательский путь. Каждый из нас сталкивается с этим удивительным миром чуть ли не каждую секунду: повсюду нас окружают миллионы этих удивительных существ, которые до сих пор представляют загадку даже для современных ученых. Большинство людей воспринимает их негативно, но действительно ли все из них приносят только вред? Можем ли мы познакомиться с ними поближе, прикоснуться к ним и узнать, какие они на самом деле? Нам хочется понять, в чем и как они могут быть нам полезны. Исследователи многих стран уделяют огромное внимание изучению бактерий, микроскопических грибов и разнообразных одноклеточных, видовое разнообразие которых превышает миллион. Эти исследования проводят с помощью специальных приборов – микроскопов. Существует огромное количество их разновидностей, отличающихся по своей специфике и особенностям, однако почётное место занял именно электронный микроскоп. Благодаря ему можно увидеть то, что неподвластно человеческому зрению, и познакомиться поближе с теми, кто нас окружает. Мы можем узнать, как выглядят микроорганизмы, как они двигаются, размножаются. Не все до сих пор знают, что на основе некоторых штаммов микроорганизмов создано достаточно много биологических препаратов, которые использует человек для улучшения роста растений и их защиты от болезней и вредителей. Именно с этими микроорганизмами мы и хотим познакомиться поближе в нашей работе с помощью электронного микроскопа.

Объекты исследования: культуры микроорганизмов

Протист хлорелла, грибы (боверия, триходерма, мульти-микориза), бактерии на основе сенной палочки (Bacillus subtilis штамм АНТ -3), фосфатмобилизирующие бактерии Pseudomonas М-5, Е-6, N-1, бактерии из группы Азотобактер.

Предмет исследования: размножение, рост и действие микроорганизмов

Цель исследования: исследовать динамику роста микроорганизмов методом электронной микроскопии и их практическое воздействие на живые объекты.

Задачи исследования:

1. Изучить литературные источники об особенностях изучаемых микроорганизмов.

2. Выбрать штаммы микроорганизмов для эксперимента.

3. Разработать стратегию проведения исследования.

4. Вырастить и размножить микроорганизмы.

5. Исследовать темпы роста штаммов с помощью электронного микроскопа Levenhuk rainbow D50L Plus на разных временных этапах эксперимента.

6. Проверить инсектицидные свойства гриба боверии, метаризиума на трещалке лилейной, тле и виноградной улитке.

7. Вырастить тимофеевку и петрушку в закрытом грунте с использованием изучаемых штаммов

Гипотезы исследования:

1) предполагаем, что темпы роста микроорганизмов легко отслеживаются с помощью электронного микроскопа;

2) предполагаем, что эндопатогенный гриб боверия по-разному влияет на живые объекты

Практическая значимость:

Фотоотчеты и видеонаблюдения, выполненные при помощи электронного микроскопа, могут использоваться для более детального изучения культур бактерий и гифов гриба на факультативных занятиях и при подготовке учащихся к олимпиаде. Выращенные штаммы могут быть применены для защиты растений от насекомых вредителей и болезней, а также как стимуляторы роста и развитие вегетативных органов.

Методы:

1. Теоретический (поиск и изучение необходимых литературных источников, теоретический анализ, объяснение собранных фактов).

2. Эмпирический (наблюдение, методы обработки данных, описание).

3. Практический (размножение штаммов микроорганизмов, выращивание растений, ведение дневника наблюдений, электронная микроскопия).

ГЛАВА 1 Литературный обзор

1.1 Выбор штаммов микроорганизмов для эксперимента

На сегодняшний день известно множество различных микроорганизмов, которые исследовали ученые в лабораториях. Но многие из них недоступны для обычного исследователя и, тем более, изучения их под электронным микроскопом. Наш выбор пал на культуры, которые тесно связанны с нашим предметом, доступны в продаже, так как входят в состав используемых человеком биологических препаратов.

Нам стало интересно, как будут действовать выращенные нами культуры микроорганизмов на живые биологические объекты, подтвердятся ли их заявленные свойства, изученные нами в описаниях и интернет-источниках?

Для изучения мы выбрали следующие микроорганизмы: фосфатмобилизирующие бактерии рода Pseudomonas М-5, Е-6, N-1, бактерии на основе сенной палочки рода Bacillus subtilis штамм АНТ -3 м штамм М-6, род бактерий Азотабактор, грибы рода боверии, метаризиума, триходермы, мульти-микориза и широко известного одноклеточного организма Хлореллы.[1]

Познакомимся с их краткой характеристикой:

Бактерии рода Pseudomonas: Pseudomonas М-5, Pseudomonas N-1, Pseudomonas Е-6, Pseudomonas R-4. В состав группы входят палочковидные грамотрицательные, не образующие спор бактерии, которые способны повышать иммунитет растений, их устойчивость к фитопатогенам, стрессовым факторам, также используется как стимуляторы роста. Могут защищать с/х культуры от бактериальных и грибковых инфекций, обеспечивают азотом, повышают урожайность растений. Бактерии этого рода – одна из наиболее изученных и обладающих полезными для растения свойствами групп микроорганизмов. Кроме перечисленного, они характеризуются способностью использовать разнообразные источники питания.

Бактерии рода Bacillus subtilis на основе сенной палочки: является одним из представителей вида аэробных спорообразующих почвенных бактерий. Для получения накопительных культур этих бактерий используют сенной экстракт. Штаммы способны уменьшать воздействие различных условно-патогенных, а также патогенных микроорганизмов. Доказано, что они вполне успешны против бактериозов, черной ножки, серой гнили, мучнистой росы. Во-первых, они способны производить антибиотические вещества и различные токсины. Во-вторых, спорообразование увеличивает жизнеспособность и сохранность этих бактерий в окружающей среде. В-третьих, эти микроорганизмы являются обычными обитателями почв. В-четвертых, они безопасны для человека.

Гриб рода Trichoderma – это полезный почвенный гриб-антагонист, встречающийся в почвах, богатых органикой. Он перерабатывает растительные остатки, паразитирует на болезнетворных грибках, улучшает структуру почвы. Активно разлагает растительные остатки, также способствует снижению жизнедеятельности патогенов растений и токсинообразущих микроорганизмов. Особые вещества, выделяемые триходермой, стимулируют рост, помогают растению противостоять стрессам, переводят питательные вещества в легкоусвояемые для растений формы. Эти же результаты гриб показал в борьбе с фитофторой на Пасленовых.

Грибы рода боверия и метаризиум широко используется в качестве энтомопатогенов (грибов-паразитов). Являются возбудителями болезни белого и зеленого мускардина, микозов, которые паразитируют на разнообразных вредителях, поражающих с/х культуры. Известны более 200 видов насекомых-вредителей, которые могут быть поражены этим грибом. Особенно эффективны гифы боверии против листогрызущих насекомых и их личинок. Грибы не оказывают влияние на большинство полезных насекомых, например, таких как пчелы. Гриб врастает в тело вредителя, поражает внутренние органы, в результате чего через несколько дней после заражения, насекомое обездвиживается и погибает, а еще через некоторое время обрастает мицелием и покрывается спорами. Споры разлетаются по округе, заражая новых жертв, а погибший вредитель становится удобрением для растений. Воздействие грибов на паразитов дает многолетний положительный эффект.

Бактерии рода азотабактор живут в почве и способны в результате процесса азотфиксации переводить газообразный азот в растворимую форму, доступную для усваивания растениями. Также Азотобактеры имеют особый белок, который защищает важную нитрогеназу от воздействия кислорода. Благодаря своей способности фиксировать молекулярный азот, тем самым повышая плодородие почвы, и стимулированию роста растений, представители рода  Azotobacter используются в сельском хозяйстве для получения азотных биоудобрений.

Хлорелла – род одноклеточных зелёных водорослей, относимый к отделу Chlorophyta, который улучшает адаптацию растений к любым, даже неблагоприятным условиям, ускоряет процесс роста и созревания, развивает корневую систему, обогащает почву микроэлементами, улучшает внешний вид, помогает увядшим растениям, восстанавливает их цвет. Хлорелла широко используется для производства кислорода в замкнутых пространствах

Мульти-микориза – новый и достаточно яркий пример симбиоза почвенных грибов-микрообразователей с корневой системой высших растений. Они не только улучшают питание растений, но и выделяют антифунгициды, которые защищают растения от заражения патогенными грибами и стимулируют их к выработке защитных веществ, а также улучшают структуру почвы

1.2 Метод электронной микроскопии

Изучение микроорганизмов с помощью электронного микроскопа имеет ряд преимуществ, например, позволяет максимально приблизить объект к исследователю, рассмотреть более мелкие детали и увидеть то, что порою невозможно рассмотреть невооруженным глазом или через световой микроскоп.

[2, с.54-55]. Для эксперимента мы использовали цифровой электронный микроскоп Levenhuk rainbow D50L Plus. Это современный прибор, который объединяет в себе возможности оптического и цифрового оборудования. Его увеличение достигает 1280 крат. Встроенная камера 2Мп позволяет фиксировать процесс наблюдений и проводить трансляции на внешнем экране, т.е. подключаться к компьютеру, что значительно расширяет спектр возможностей исследователя. Яркие светодиоды расположены с двух сторон предметного столика. Верхняя и нижняя подсветки позволяют изучать как прозрачные, так и непрозрачные объекты [3].

ГЛАВА 2 Практическая часть 2.1 Общая стратегия выращивания и размножения штаммов микроорганизмов.

1. Выбранные культуры микроорганизмов первоначально были заселены в пробирки, а позже в химические колбы с резиновыми пробками, так как пробирки оказались слишком малы для выращивания штаммов.

2. В качестве источника макро- и микроэлементов, мы использовали сухие удобрения «Агриколла» и «Малышок», который добавляли согласно инструкции, указанной на упаковке, но в пересчете на изучаемый микрообъект (2г на 1л воды).

3. Для восполнения дефицита белка использовали прокипяченный раствор дрожжей, а в качестве дополнительного источника энергии – сахарозу.

4. Минеральные удобрения, дрожжи и сахарозу, мы добавляли 1 раз в 3-5 дней.

5. Все компоненты хорошо перемешивали, затем интенсивно взбалтывали и оставляли в помещении при комнатной температуре. Бактериальные препараты были готовы примерно через 24-48 часов, грибы и водоросли – через 7 дней

6. Периодически встряхивали колбы для стимулирования активности микроорганизмов. Обращали внимание на отсутствие посторонних запахов, которые не характерны для данных микроорганизмов.

7. Один раз в 2–3 дня открывали пробки для удаления избытка газов, которых образовывалось достаточно много, что иногда приводило к выстреливанию.

8. Микроорганизмы на основе бактерии рода Bacillus росли в виде пленки на поверхности, остальные осуществляли свой рост, заселяя толщу раствора, но с разной интенсивностью и скученностью.

9. Хранили размноженные микроорганизмы при комнатной температуре в помещении.[4]

10. Раз в 3-6 дней брали культуры микроорганизмов для изучения под электронным микроскопом марки Levenhuk rainbow D50L . Для рассмотрения более крупных экспозиций, фото и видеонаблюдений подключали микроскоп к монитору компьютера

11. Один раз в эти же 3-6 дней выполняли фотосъемку микрообъектов с монитора компьютера, рассматривали кучность, образование колоний, рост мицелия. Сравнивали темпы роста изучаемых штаммов на разных временных этапах.

12. Все рассматриваемые детали эксперимента фиксировали в дневнике наблюдений

Фото 1 – Микроорганизмы под микроскопом

Фото 2 – Подкормка

2.2 Микроорганизмы на разных этапах эксперимента.

Для достоверности, убедительности и зрительной визуализации из множества сделанных фотографий были выбраны ключевые для трех временных этапов эксперимента, которые вошли в представленную таблицу:

М/О	Первый этап (начальный) 16.06	Второй этап (промежуточный) 21.06	Третий этап (окончательный) 28.06
Азотобактер
Бациллус
Боверия+ Метаризиум
Метаризиум
Мульти микориза
Псевдомоны
Триходерма
Хлорелла мин.
Хлорелла макс.

Обобщающая таблица выращивания микроорганизмов в колбах. Пробирки из- за небольшого объема позднее были исключены из эксперимента

М/о	Начальный этап	Промежуточный этап	Заключительный этап
Боверия + Метаризиум	Неравномерно и негусто заселён бактериями, Отдельных колоний не наблюдается. Образование пены и газов, выбрасывание пробок.	Заселены равномерно и негусто. Появление небольших колоний Образование пены и газов, выбрасывание пробок.	Раствор с обильной пеной 8-10 мм. Осадок отсутствует. Выбрасывание пробки не наблюдается.
Триходерма	Равномерно и густо заселена грибом. Видны отдельные крупные колонии. Появление больших черных круглых объектов неизвестного происхождения.	Равномерно и густо заселена грибом. Появление колоний. Черные объекты исчезли	Мутный раствор без пены. Осадок отсутствует. Выбрасывание пробки не наблюдается
Псевдомона	Равномерно и густо заселена бактериями. Присутствуют отдельные небольшие колонии. Образование пены и газов. Наблюдается выбрасывание пробки	Увеличение концентрации числа колоний. Равномерно и густо заселена бактериями Раствор с пеной. Наблюдается выбрасывание пробки.	Раствор с пеной и грибовидным образованием 1-3 мм. Выбрасывание пробки не наблюдается.
Хлорелла	Заселена неравномерно и негусто, концентрация хлореллы небольшая. Видны отдельные небольшие колонии.	Увеличение концентрации хлореллы и числа колоний, заселена неравномерно и негусто.	Яркий насыщенный раствор, обогащенный хлореллой. Выбрасывание пробки не наблюдается. Осадок отсутствует
Бациллус	Образование пены и газов, выбрасывание пробок в колбе. Равномерно и густо заселен бактериями. Видны крупные колонии	Образование пены и газов, выбрасывание пробок. Равномерно и густо заселен бактериями. Видны огромные колонии.	Мутный раствор без пены. Присутствует осадок. Выбрасывания пробки нет.

Фото 3 – м/о в пробирках

Фото 4 – м/о в колбах

Вывод: в начале эксперимента быстрее всех динамика роста проявилась у культуры бактерий псевдомон, бактогена, азотобактор, и хлореллы. К середине эксперимента темпы роста активно сохранили псевдомоны, азотобактер, бактоген. Также стали активно размножаться мульти-микориза, бациллус, триходерма. К концу эксперимента наиболее высокие результаты показали псевдомоны, бактоген, боверия, мульти-микориза. В ходе всего эксперимента самыми активными в размножении и росте были псевдомоны и бактоген.

По итогу наблюдений, мы видим, что микроорганизмы в основном растут хорошо, в окончании все растворы приобрели свой особый внешний вид
2.3 Влияние боверии на живые объекты Действие боверии на трещалку Лилейную, тлю и улиток

Для проверки действия боверии на живые объекты был выбран злостный вредитель лилий – жук-листоед трещалка лилейная[5]. Трещалка лилейная питается листьями и бутонами лилий, а ее личинки укрываются тут же на растениях в защитных домиках, напоминающих комочки грязи. Жук способен уничтожить все зеленые части растения и вызвать их гибель до 90%.

Для эксперимента было отобрано 9 взрослых жуков, которых мы поместили в прозрачный пластиковый контейнер с перфорацией в верхней крышке. 27 июня жуки были обработаны выращенной нами суспензией боверии путем двукратного опрыскивания жуков с периодичностью в 10 минут. Затем они были закрыты крышкой и поставлены в помещение с комнатной температурой. Минимальный период ожидаемого действия, описанный в источниках – 48 часов.

Результаты действия боверии на трещалку лилейную:

Дата/время	Активны	Активность снижена	Погибшие	Появление мицелия гриба
27/6 спустя 4 ч после обработки	4	2	2, 1 жука не видно из-под листьев	-
27/6 спустя 14 ч после обработки	1	1	7	-
29/6 спустя 26 ч после обработки	0	1	8	На 1 появился белый налет
30/6 спустя 54 ч после обработки	0	0	9	2 жука покрыты белым мицелием боверии

Фото 5 – Начало эксперимента

Фото – Гибель жуков. Мицелий Боверия

Вывод: анализ эксперимента показал высокую эффективность действия боверии в короткие сроки на листогрызущего жука трещалку лилейную. Первые погибшие жуки были зафиксированы уже через 4 часа эксперимента (22%) ,через 26 часов погибших было уже 88% и зафиксировано первое обрастание вредителя белым мицелием боверии. Это оказалось значительно быстрее ожидаемого результата.

Действие Боверии на виноградную улитку

Фото 7 – Виноградная улитка

Фото 8 – Яйца улитки

Нам было интересно узнать, как действует боверия на брюхоногих моллюсков, так как ответа на этот вопрос в источниках мы не нашли. Многие брюхоногие, включая улитку виноградную, в дождливые годы активно поедают садовые растения, нанося им достаточно заметные повреждения, портят их внешний вид, нарушают ландшафтный дизайн наших зеленых территорий.

Эксперимент проводился в период с 27.06 по 11.08.2023 года на трёх виноградных улитках в закрытых ёмкостях, в которых были созданы условия, максимально приближенные к их естественной среде. Улиток обрызгивали боверией 1 раз в 2-5 дня. Рацион улиток составляли кусочки огурца, мякоть кабачка, листья лопуха и березы. Анализ эксперимента показал, что на протяжении всего периода исследования все 3 улитки продолжали вести обычный образ жизни и даже откладывали яйца в специально выкопанные ими в почве туннели.

Средство не дало ожидаемых результатов и никак не отразилось на жизнедеятельности улиток. С фотоотчетом эксперимента можно познакомиться в приложении.

Действие Боверии на тлю на открытом участке.

Фото 9 – Тля

При опрыскивании боверией массовых скоплений тли в течение 3 дней на мяте перечной на открытой территории, мы увидели , что часть тли действительно погибла. По визуализированным наблюдениям их гибель лежит в пределах от 40% до 60%.Можно сделать вывод, что на открытом участке эффект действия боверии на тлю дал менее значимые результаты, в сравнении с обработкой этим же препаратом жуков-листоедов.

2.4 Выращивание тимофеевки петрушки с использованием культур микроорганизмов.

Время проведения эксперимента:

С 17.01 по 24.02 Петрушка.

С 1.02 по 8.04 Тимофеевка луговая.

Для исследования были взяты пластиковые контейнеры в количестве 12 штук, в которые в разные сроки были высажены семена изучаемых растений. С периодичностью 1 раз в 3-5 дней растения обрабатывались штаммами бактерий рода псевдомона, бациллус, грибом триходермой, дополнительно была добавлена культура дрожжей и чистая прокипяченная вода[6]. С подробным дневником наблюдений можно познакомиться в приложении.

Обобщенная таблица полученных результатов по тимофеевке луговой и петрушке сорта «Славянская»

Растения период	Период 1-й 11 -15 февраля	Период 2-й 21 -28 февраля	Период 3-й 12 марта- 8 апреля
Тимофеевка луговая	Отмечается хороший, интенсивный рост во всех культурах. Однако при обработке триходермой, бациллусом и дрожжами заметна вялость и пожелтение листьев	Наблюдается незначительное пожелтение листьев при поливе дрожжами, триходермой, бациллусом. Наилучший эффект дает хлорелла и вода	Лучший результат показала хлорелла. Использование триходермы, бациллуса, псевдомоны оказало наименьшую результативность.
Растения период	Период 1-й 17-31 января	Период 2-й 3-28 февраля	Период 3-й 3-28 марта
Петрушка	Самый интенсивный рост и крупные листья отмечаем при поливе бациллусом и дрожжами, самые короткие листья при использовании триходермы и псевдомоны	Действие большинства препаратов аналогично январскому периоду. Наблюдаем большую разницу в размере листьев. Наилучший результат на этом этапе показали дрожжи: размер листьев увеличился от 0,9см до 5см.	Наилучшие результаты показывает бациллус и дрожжи. С некоторой периодичностью слабое развитие наблюдалось при использовании воды, триходермы и псевдомоны.

Фото 10 – Высадка растений

Фото 11 – Растения после обработки

Вывод: При выращивании тимофеевки луговой растения класса Однодольные и петрушки сорта «Славянская» класса Двудольные в закрытом грунте наилучшие результаты на рост вегетативных органов у петрушки показали штаммы хлореллы. Хуже всего на этапе прорастания растения реагировали на воздействие бациллуса, а на стадии активного роста – триходермы и дрожжей.

При обработке тимофеевки лучшие результаты на величину листа оказали культуры микроорганизмов бациллуса и дрожжей. Они дали самые крупные листья (до 5см), однако после обработки дрожжами их стебли стали неустойчивыми. По итогу двух наблюдений мы видим, что микроорганизмы по-разному влияют на различные культуры растений, и общих совпадений не наблюдаем. Вялость и пожелтение листьев объясняются конкуренцией из-за высокой густоты посева, неблагоприятным зимним периодом и минимальным процентом солнечного света при выращивании растений.

ГЛАВА 3

Результаты и их обсуждение

1. Исследовав штаммы микроорганизмов с помощью электронного микроскопа (Levenhuk rainbow D50L Plus), наилучшие результаты в темпах роста практически на всех этапах исследования показали: триходерма, мульти-микориза и хлорелла. Данные организмы образовали наибольшее количество колоний и скопления гифов. На начальном этапе медленнее всех росли псевдомона и хлорелла, на промежуточном этапе – боверия и мульти-микориза.

2. При выращивании микроорганизмов на разных этапах нам удалось отследить и сфотографировать образованные ими скопления, колонии и группы, а также зафиксировать перемещение этих организмов.

3. Мы проверили действие боверии на такие живые организмы, как трещалка лилейная, тля, улитка виноградная, и выяснили, что наиболее мощное воздействие боверия оказала на трещалку лилейную. На тлю действие оказалось не столь эффективным и никак не повлияло на виноградную улитку. Предполагаем, что эффективность препарата зависит от концентрации и места размещения живого объекта. В закрытых емкостях препарат работает гораздо лучше.

4. При выращивании тимофеевки луговой и петрушки с применением культур микроорганизмов из нашей лаборатории, мы увидели, что самые крупные листья у петрушки были при взаимодействии штаммов бациллуса и дрожжей с растением, лучшее влияние на устойчивость стебля от полегания оказали триходерма, хлорелла и псевдомоны. На тимофеевку луговую лучшие результаты на всех этапах оказала хлорелла.

Трудности в проведении исследования:

• Микроорганизмы оказались достаточно трудными объектами для нашего изучения. Наш электронный микроскоп не позволяет увидеть детали их внутреннего строения, и мы видим лишь их общие очертания, движения и отдельные скопления. Они достаточно быстро размножаются, выделяют большое количество газов, неприятно пахнут, выбивают пробки, увеличивая риск попадания других микрообъектов, что и было зафиксировано фокусом камеры микроскопа.

• Из-за постоянного движения микроорганизмов, их сложно сфотографировать и сделать четкий кадр даже через монитор компьютера, так как они постоянно «ускользают» от направленного на них фокуса камеры.

• Зимний период оказался не совсем благоприятным для наблюдения за растениями. В это время вегетация растений снижена, солнечного света не хватает, процессы жизнедеятельности приостановлены, и результаты воздействия штаммов не так эффективны, как летом.

• Сложно было проверить воздействие энтомопатогенного гриба боверия

• на открытой местности из-за влияния природных факторов: дождя, росы и ветра.

• Из за большого количества исследуемых объектов, самым сложным для нас стало обобщение полученных результатов и сведение их в небольшие таблицы и краткие выводы.

• Живые объекты также непросты в изучении, ведь их нужно найти, собрать и создать необходимые для них и контролируемые для нас условия.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В нашей работе мы решили не только заглянуть в удивительный мир микроорганизмов, но и показать их практическое и действительно полезное для человека воздействие на другие живые организмы, которое любой человек может реализовать и применить в своей жизни. Мы выяснили, что культуры микроорганизмов не так просты в изучении, как это может показаться на первый взгляд. Для каждого из них характерны свои специфические особенности, которые по-разному проявляются и в скорости их роста, и в силе воздействия на другие живые объекты. Считаем, что при выращивании и размножении штаммов микроорганизмов нужны строго контролируемые условия и стерильность, которые, в отличие от школ, могут создать только специальные лаборатории.

Наша первая гипотеза не подтвердилась, так как отследить темпы роста микроорганизмов из-за их малых размеров и высокой скорости размножения сложно, так как это требует использования еще более мощных микроскопов и определенных условий в специальных лабораториях.

Наша вторая гипотеза подтвердилась. Действительно, боверия видоспецифична и по-разному влияет на живые объекты. Наилучшие результаты она показывает на листогрызущих насекомых, какие заявлены в ее описании.

АКТУАЛЬНОСТЬ И ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Мы считаем, что наша работа достаточно актуальна. Она позволила нам войти в мир микрообъектов и, как бы изнутри, понаблюдать и проследить за ними, став их частью. Это доказывают наши фотоотчеты, видео и дневники наблюдений. Они могут быть использованы исследователями, которые захотят подробнее изучить эти микроорганизмы в дальнейшем.

Нашей работой мы хотим привлечь внимание широкого круга людей, наглядно показывая, какое воздействие могут оказывать правильно используемые биологические методы борьбы с вредителями на примере почвенного эндопатогенного гриба боверии. Радует, что в настоящее время человек стремится к здоровому образу жизни. И для того, чтобы поддерживать такой ритм жизни, нужно потреблять экологически чистую пищу, без использования химикатов. Именно поэтому тема нашей работы актуальна и важна. Сейчас мы изучаем возможность проведения эксперимента на тропическом эндопатогенном грибе кордициуме военном в нашем климате и на наших вредителях. Уже собрана информация о его особенностях, спектрах влияния, намечен путь приобретения и общая стратегия исследования.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Домашние биопрепараты. [Электронный ресурс]. - Режим доступа: https://procvetok.com/ru/articles/domashnie-biopreparaty-vnimanie-k-detalyam/

2. Дашков, М.Л. Биология 11 класс/ Издательство. УП «Народная асвета», 2021. -С.54-55

3. Левенгук микроскоп. [Электронный ресурс]. – режим доступа:

https://ru1.warbletoncouncil.org/microscopio-simple-14636

1. Принципы и схемы использования биопрепаратов. Бесплатная запись семинара И.А.Русских. [Электронный ресурс]. - Режим доступа: https://www.youtube.com/watch?v=gKkGHxzwZoE

2. Мечта любого огородника: Боверия и Метаризиума. [Электроныый ресурс]. - Режим доступа: https://vk.com/wall284762134_17724

3. Совместное применение триходермы и регуляторов роста. [Электронный ресурс]. - Режим доступа: https://cyberleninka.ru/article/n/sovmestnoe-primenenie-trihodermy-i-regulyatorov-rosta-protiv-vozbuditelya-k ornevyh-gniley-ogurtsa-rhizoctonia-solani/viewer

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение 1

Дневник наблюдений. Выращивание микроорганизмов

Биопрепараты	03.06.2022 пробирки начало	06.06.2022 пробирки	09.06.2022 пробирки конец	16.06.2022 колбы начало	21.06.2022 колбы	28.06.2022 колбы конец
Бактоген	Равномерно и густо заселен бактериями. Отдельных колоний не наблюдается.	Равномерно и негусто заселен бактериями. Видны небольшие колонии.		Образование пены и газов, выбрасывание пробок в колбе. Равномерно и густо заселен бактериями. Видны крупные колонии.	Образование пены и газов, выбрасывание пробок. Равномерно и густо заселен бактериям Видны огромные колонии.	Мутный раствор без пены. Присутствует осадок. Выбрасывания пробки нет.
Боверия+Метаризиум	Равномерно и негусто заселен бактериями. Отдельных колоний не наблюдается.		Равномерно и негусто заселен бактериями. Появление отдельных небольших колоний	Образование пены и газов, выбрасывание пробок. Неравномерно и негусто заселен бактериями, маленькая концентрация. Отдельных колоний не наблюдается.	Образование пены и газов, выбрасывание пробок. Заселены равномерно и негусто. Появление небольших колоний.	Раствор с обильной пеной около 8-10 мм. Осадок отсутствует. Выбрасывание пробки не наблюдается.
Триходерма	Равномерно и густо заселена грибом. Видны отдельные крупные колонии. Присутствуют непонятные большие черные круглые объекты. Равномерно и густо заселена мицелиями гриба с корнями..			Равномерно и густо заселена грибом. Видны отдельные крупные колонии. Присутствуют непонятные большие черные круглые объекты.	Равномерно и густо заселена грибом. Появление колоний. черные объекты пропали.	Мутный раствор без пены.
Мультимикориза				Неравномерно и негусто заселена мицелиями гриба с корнями высших растений. Отдельных колоний не наблюдается.	Образование пены. Концентрация увеличиласьРавномерно и густо заселена мицелиями гриба с корнями. Видны отдельные небольшие колонии.	Раствор с пеной и грибовидным цельным образованием 3-5 мм с отслаивающимися частями.
Азотобактер	Увеличение концентрации бактерий в несколько раз, заселены густо и равномерно. Появление отдельных крупных колоний.		Равномерно и густо заселен бактериями Видны отдельные небольшие колонии.	Образование пены и газов. Наблюдается выбрасывание пробки. Равномерно и густо заселен бактериями. Число колоний уменьшается		Раствор с пеной 1-3 мм. Выбрасывание пробки не наблюдается.
Метаризиум	Равномерно и густо заселен. Присутствуют отдельные небольшие колонии.		Концентрация уменьшилась. Отдельных колоний не наблюдается.	Заселен неравномерно и негусто. Концентрация на том же уровне. Появляются отдельные крупные колонии.		Раствор полупрозрачный с осадком, сверху по краю видны отдельные взвеси.
Боверия+Метаризиум	Заселена неравномерно и негусто. Наблюдается увеличение куртинов грибов. Появление небольших колоний			Образование газов. Наблюдается выбрасывание пробки. Заселена неравномерно и негусто. Видны куртины грибов в небольших количествах.	Образование газов. Выбрасывание пробки. Заселена неравномерно и негусто. Увеличение числа куртинов грибов. Появление крупных колоний.	Раствор с осадком. Выбрасывание пробки не наблюдается.
Хлорелла мин.	Заселена неравномерно и не густо. Присутствуют отдельные очень небольшие колонии.	Увеличение концентрации хлореллы и числа колоний в несколько раз.	Уменьшение концентрации хлореллы и числа колоний.	Наблюдается огромное количество непонятных черных крупных объектов, предположительно колонии хлореллы.	Наблюдается обесцвечивание раствора, черные круглые объекты исчезли. Видны небольшие колонии хлореллы. Концентрация маленькая.	Отсутствие цвета у раствора. Предположительно хлорелла погибла.
Хлорелла макс.	Равномерно и густо заселена. Присутствуют отдельные крупные колонии		Увеличение концентрации хлореллы и числа колоний.	Заселена неравномерно и негусто, концентрация хлореллы небольшая. Видны отдельные небольшие колонии.	Увеличение концентрации хлореллы и числа колоний, заселена неравномерно и негусто.	Яркий, насыщенный раствор, обогащенный хлореллой.
Псевдомона	Наблюдается маленькая концентрация, заселены неравномерно. Отдельные колонии отсутствуют. Видны круглые черные объекты.	Увеличение концентрации заселены неравномерно и негусто. Появление отдельных крупных колоний. Видны непонятные круглые черные объекты.	Уменьшение концентрации бактерий. Колоний не наблюдается. Видны непонятные круглые черные объекты.	Образование пены и газов. Наблюдается выбрасывание пробки. Равномерно и густо заселена бактериями. Присутствуют отдельные небольшие колонии.	Раствор с пеной. Наблюдается выбрасывание пробки. Увеличение концентрации числа колоний. Равномерно и густо заселена бактериями.	Раствор с пеной и грибовидным образованием 1-3 мм. Выбрасывание пробки не наблюдается.

Фото 12 –Конечный этап выращивания м/о в пробирках

Фото 13-Помутнение раствора триходерма

Фото 14 – конечный этап выращивания м/о в колбах

Фото 15 – Появления осадка в растворе бактогена

Фото 16 – образование пены у раствора мульти-микоризы

Фото 17 – Подкормка раствора хлореллы

Приложение 2

Влияние боверии на живые объекты

2.1 Лилейная трещалка

Фото18 – Начало эксперимента (создание условий жизни)

Фото 19 – Жуки начинают покрываться мицелиями боверии

2.2 Тля

Фото 20 – Начальная стадия эксперимента

Фото 21 – Окончание эксперимента

2.3. Виноградные Улитки

Объект	Дата, количество, питание	Кратность обработки	Закрытый/открытый	Наблюдения
Виноградная улитка	27.06 – 28.06 3шт, листья лопуха	1 раз	Закрытый	Собирание и поселение улиток в контейнер с крышкой Более активны ночью, слышен звук «шебуршания» рано утром, довольно прожорливы
Виноградная улитка	30.06 – 03.07 3шт, кусочки огурца	1 раз	Закрытый	Постоянный звук «шебуршания» рано утром, принято решение кормить раз в 3 дня, 1 из улиток зарылась в грунте
Виноградная улитка	06.07 – 3шт, кожура с мякотью кабачка	1 раз	Закрытый	1 из улиток вырыла тоннель в контейнере и начала откладывать яйца, остальные без изменений
Виноградная улитка	09.07 – 3шт, кожура с мякотью	1 раз	Закрытый	Улитка продолжает откладывать яйца, остальные в норме
Виноградная улитка	12.07 – 3шт, кусочки моркови	1 раз	Закрытый	Улитка закопала яйца песком и выбралась на поверхность, остальные без изменений
Виноградная улитка	15.07 – 18.07 3шт, листья березы	1 раз	Закрытый	Снижение аппетита улиток, вероятно листья березы им не по вкусу
Виноградная улитка	21.07 –24.07 3шт, листья лопуха	1 раз	Закрытый	Снижение активности улиток, пропал звук «шебуршания»
Виноградная улитка	27.06 – 02.08 3шт, кусочки огурца	1 раз	Закрытый	Улитки спрятались в панцирях и не показываются. Чистка контейнера, замена грунта. Улитки ведут прежний образ жизни
Виноградная улитка	05.08 –08.08 3шт, кожура с мякотью кабачка	1 раз	Закрытый	Изменений нет, эффекта от средства не наблюдается
Виноградная улитка	11.08 –14.08 3шт, листья лопуха	1 раз	Закрытый	Из-за повышения температуры, улитки спрятались в панцирях и не высовываются.Увлажнение грунта водой для поддержания комфортной температуры в контейнере

Фото 22 – Кормление улитки

Фото 23 – Заселение улиток

Приложение 3

Дневник наблюдений,выращивание петрушки

Дата	Микроорганизмы	Наблюдения
17.01	Бациллус	Крупные листья и стебли, быстрый рост, длина листьев 0,5-1,2 см, стеблей 8-9 см	Появление новых листьев
	Псевдомона	Длина листьев 0,5-1 см, стеблей 5-7 см
	Хлорелла	Мелкие листья и стебли, длина листьев 0,6 см, стебли длиной 4-5 см
	Триходерма	Самые короткие листья длиной 0,4-0,7 см, длина стеблей 5-6 см
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья и стебли длиной 0,9-1,5 см и 8-10 см соответственно
	Вода	Самые короткие листья, длиной 0,4-0,7 см, размер стеблей около 5-6 см
20.01	Бациллус	Крупные листья и стебли, длина листьев 0,8-1,5 см, стеблей 8,5-9,5 см
	Псевдомона	Длина листьев 0,75-1 см, стеблей 5,5-7 см
	Хлорелла	Длина листьев 0,75 см, стебли длиной 5 см
	Триходерма	Самые короткие листья длиной 0,5-0,8 см, стебли 5-6 см
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья и стебли длиной 1-1,75 см и 8,5-10 см соответственно
	Вода	Самые короткие листья длиной 0,5-0,8 см, размер стеблей около 5-6 см
27.01	Бациллус	Крупные листья и толстые стебли, быстрый рост, длина листьев 1-1,7 см, стеблей 9-10 см	Точечно подрыхлили и подкормили, появление новых листьев
	Псевдомона	Длина листьев 0,75-1 см, стеблей 6-7,5 см
	Хлорелла	Длина листьев 0,8 см, стебли длиной 5,5-6 см
	Триходерма	Самые короткие листья и стебли длиной 0,5-0,8 см и 5-6 см соответственно, низкий рост
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья и стебли длиной 2 см и 9-10,5 см соответственно, стебли неустойчивые, быстрый рост
	Вода	Маленькие листья длиной 0,6-0,8 см, размер стеблей около 5,5-6,5 см
31.01	Бациллус	Крупные листья и толстые устойчивые стебли, длина листьев 1,25-1,9 см, стеблей 10 см
	Псевдомона	Длина листьев 1 см, стеблей 7-8 см, стебли неустойчивые, появление новых листьев
	Хлорелла	Появление новых листьев, длина листьев 0,9 см, стебли длиной 6 см, устойчивые
	Триходерма	Самые короткие листья и стебли длиной 0,6-0,8 см и 5,5-6 см соответственно, низкий рост, стебли неустойчивые, появление новых листьев
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья и стебли длиной 2-2,2 см и 9,5-10,5 см соответственно, стебли неустойчивые
	Вода	Появление новых листьев, длина 0,9 см, размер стеблей около 6-6,5 см, стебли устойчивые
03.02	Бациллус	Крупные листья и толстые устойчивые стебли, длина листьев 1,5-2 см, стеблей 10,5 см
	Псевдомона	Длина листьев 1-1,1 см, стеблей 7,5-8,5 см, стебли неустойчивые
	Хлорелла	Длина листьев 1-1,2 см, стебли длиной 6,5-7,5 см, устойчивые, быстрый рост
	Триходерма	Самые короткие листья и стебли длиной 0,7-0,8 см и 6-6,25 см соответственно, низкий рост, стебли неустойчивые
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья и стебли длиной 2-2,3 см и 10-10,5 см соответственно, стебли неустойчивые, не наклонена к свету
	Вода	Длина листьев 1-1,1 см, размер стеблей около 6,25-7 см, стебли устойчивые
07.02	Бациллус	Крупные листья и толстые устойчивые стебли, длина листьев 1,75-2,2 см, стеблей 10,5-11 см
	Псевдомона	Длина листьев 1-1,1 см, стеблей 8-9 см, стебли неустойчивые
	Хлорелла	Длина листьев 1,2-1,4 см, стебли длиной 7,5-8 см, устойчивые, быстрый рост, появление новых листьев
	Триходерма	Самые короткие листья и стебли длиной 0,7-0,8 см и 6,25-6,75 см соответственно, низкий рост, стебли неустойчивые
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья и стебли длиной 2-2,5 см и 10,5-11 см. Соответственно, стебли неустойчивые, не наклонены к свету
	Вода	Длина листьев 1-1,2 см, размер стеблей около 6,5 -7 см, стебли устойчивые, появление новых листьев
10.02	Бациллус	Крупные листья и толстые устойчивые стебли, длина листьев 1,9-2,2 см, стеблей 10,5-11 см, появление новых листьев	Точечно подрыхлили и подкормили
	Псевдомона	Длина листьев 1,1-1,2 см, стеблей 8,5-9,5 см, стебли неустойчивые, появление новых листьев
	Хлорелла	Длина листьев 1,3-1,5 см, стебли длиной 8-9 см, устойчивые, быстрый рост
	Триходерма	Самые короткие листья и стебли длиной 0,8-0,9 см и 6,5-7 см соответственно, низкий рост, стебли неустойчивые
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья и стебли длиной 2-2,5 см и 10,5-11,5 см. Соответственно, стебли неустойчивые, не наклонены к свету
	Вода	Длина листьев 1-1,3 см, размер стеблей около 7 -7,5 см, стебли устойчивые
17.02	Бациллус	Крупные листья и толстые устойчивые стебли, длина листьев 2-2,5 см, стеблей 11 см
	Псевдомона	Длина листьев 1,1-1,2 см, стеблей 9,5-10,5 см, стебли неустойчивые, растет негусто
	Хлорелла	Длина листьев 1,3-1,8 см, стебли длиной 8,5-9,5 см, устойчивые
	Триходерма	Самые короткие листья и стебли длиной 0,8-1 см и 7-7,5 см соответственно, низкий рост, стебли неустойчивые
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья и стебли длиной 2-3 см и 11-11,5 см соответственно, стебли неустойчивые, не наклонены к свету
	Вода	Длина листьев 1-1,5 см, размер стеблей около 7,5 см, стебли устойчивые
21.02	Бациллус	Крупные листья длиной 2-2,5 см, толстые и устойчивые стебли размером около 11-11,5 см, появление новых листьев
	Псевдомона	Длина листьев 1-1,3 см, стеблей 11см, стебли неустойчивые, растет негусто
	Хлорелла	Длина листьев 1,5-2 см, стебли прямые, устойчивые длиной 9-10 см, появление новых листьев
	Триходерма	Самые короткие листья и стебли длиной 0,8-1 см и 7-8 см соответственно, стебли неустойчивые, низкий рост
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья длиной 2-3 см, стебли неустойчивые, самые крупные длиной 12 см, не наклонены к свету
	Вода	Длина листьев 1-1,5 см, размер стеблей около 7-8 см, стебли устойчивые, появление новых листьев
24.02	Бациллус	Крупные листья длиной 2-2,8 см, толстые и устойчивые стебли размером около 11-12 см
	Псевдомона	Длина листьев 1-1,4 см, стеблей 11-11,5 см, стебли неустойчивые, растет негусто, появление новых листьев
	Хлорелла	Длина листьев 1,5-2 см, стебли прямые, устойчивые длиной 9-10 см
	Триходерма	Самые короткие листья и стебли длиной 0,8-1 см и 7-8 см соответственно, стебли неустойчивые, низкий рост, появление новых листьев
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья длиной 2-3 см, Стебли неустойчивые, самые крупные длиной 12-12,5 см, не наклонены к свету, подсыхание некоторых листьев
	Вода	Длина листьев 1-1,5 см, размер стеблей около 7,5-8 см, стебли устойчивые
28.02	Бациллус	Крупные листья длиной 2-3 см, толстые и устойчивые стебли размером около 11,5-12,5 см	Точечно подрыхлили
	Псевдомона	Длина листьев 1-1,5 см, стеблей 11,5-12 см, стебли неустойчивые, растет негусто
	Хлорелла	Длина листьев 1,7-2,2 см, стебли прямые, устойчивые длиной 9,5-10,5 см
	Триходерма	Самые короткие листья и стебли длиной 0,9-1,25 см и 7,5-8,25 см соответственно, стебли неустойчивые, низкий рост
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья длиной 2,5-3,25 см, стебли неустойчивые, самые крупные длиной 12-13 см, не наклонены к свету
	Вода	Длина листьев 1,25-1,5 см, размер стеблей около 7,5-8,5 см, стебли устойчивые, появление новых листьев
03.03	Бациллус	Крупные листья длиной 2-3 см, толстые и устойчивые стебли размером около 11,7-12,5 см
	Псевдомона	Длина листьев 1,75 см, стеблей 12-12,5 см, стебли неустойчивые, растет негусто
	Хлорелла	Длина листьев 1,9-2,2 см, стебли прямые, устойчивые длиной 10,5-11 см
	Триходерма	Самые короткие листья и стебли, длиной 1-1,25 см и 8-8,25 см соответственно, стебли неустойчивые, низкий рост
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья длиной 2,8-3,25 см, стебли неустойчивые, самые крупные длиной 12,5-13 см, не наклонены к свету
	Вода	Длина листьев 1,25-1,5 см, размер стеблей около 8-9 см, стебли устойчивые
08.03	Бациллус	Крупные листья длиной 2,2-3 см, толстые и устойчивые стебли размером около 12-12,5 см
	Псевдомона	Длина листьев 1,75 см, стеблей 12,5 см, стебли неустойчивые, растет негусто
	Хлорелла	Длина листьев 2-2,2 см, стебли прямые, устойчивые длиной 11 см
	Триходерма	Длина листьев 1,25-1,75 см, стебли самые короткие длиной 8,5-8,75 см соответственно, стебли неустойчивые, быстрый рост
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья длиной 3-3,25 см, стебли неустойчивые, самые крупные длиной 12,5-13 см, не наклонены к свету
	Вода	Самые короткие листья, длина листьев 1,25-1,5 см, размер стеблей около 8,5-9,5 см, стебли устойчивые, низкий рост
14.03	Бациллус	Крупные листья длиной 2,5-3 см, толстые и устойчивые стебли размером около 12,5-13 см	Точечно подрыхлили и подкормили
	Псевдомона	Длина листьев 2 см, стеблей 13 см, стебли неустойчивые, растет негусто
	Хлорелла	Длина листьев 2-2,2 см стебли прямые, устойчивые длиной 11-11,5 см, появление новых листьев
	Триходерма	Длина листьев 1,5-2 см, стеблей 9-10 см, стебли неустойчивые, появление новых листьев, быстрый рост
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья длиной 3-3,7 см, стебли неустойчивые, самые крупные длиной 13-13,5 см, не наклонены к свету
	Вода	Самые короткие листья длиной 1,5 см, размер стеблей около 9-10 см, стебли устойчивые, появление новых листьев, низкий рост
17.03	Бациллус	Крупные листья длиной 2,75-3,2 см, толстые и устойчивые стебли размером около 12,5-13 см
	Псевдомона	Длина листьев 2-2,2 см, стеблей 13 см, стебли неустойчивые, растет негусто
	Хлорелла	Длина листьев 2,5 см стебли прямые, устойчивые длиной 11,5-12 см
	Триходерма	Длина листьев 2 см, стеблей 10-11 см, стебли неустойчивые, быстрый рост
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья длиной 3,5-4 см, стебли неустойчивые, самые крупные длиной 13,5 см, не наклонена к свету
	Вода	Самые короткие листья и стебли длиной 1,5-2 см и 9,5-10,5 см соответственно, стебли устойчивые
21.03	Бациллус	Крупные листья длиной 3-3,2 см, толстые и устойчивые стебли размером около 13-13,5 см
	Псевдомона	Длина листьев 2-2,2 см, стеблей 13 см, стебли неустойчивые, растет негусто
	Хлорелла	Длина листьев 2,5 см стебли прямые, устойчивые длиной 12-12,5 см
	Триходерма	Длина листьев 2 см, стеблей 11-12 см, стебли неустойчивые
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья длиной 4 см, стебли неустойчивые, самые крупные длиной 14 см, не наклонены к свету
	Вода	Длина листьев 2 см, размер стеблей около 11 см, стебли самые короткие и устойчивые
24.03	Бациллус	Крупные листья длиной 3-3,5 см, толстые и устойчивые стебли размером около 13-14 см
	Псевдомона	Длина листьев 2-2,5 см, стеблей 13,5 см, стебли устойчивые, растет негусто
	Хлорелла	Длина листьев 2,5-3 см стебли прямые, устойчивые длиной 12-13 см
	Триходерма	Длина листьев 2-2,5 см, стеблей 12 см, стебли устойчивые
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья длиной 4-4,5 см, стебли неустойчивые, самые крупные длиной 14 см, не наклонены к свету
	Вода	Длина листьев 2-2,5 см, размер стеблей около 11-12 см, стебли устойчивые
28.03	Бациллус	Крупные листья длиной 3-4 см, толстые и устойчивые стебли размером около 15 см, толщиной 0,2 см, появление новых листьев
	Псевдомона	Длина листьев 2-2,5 см, стеблей 13,5 см, стебли устойчивые толщиной 0,1 см, появление новых листьев
	Хлорелла	Длина листьев 2,5-3 см стебли прямые, устойчивые длиной 12-13 см, толщина составляет 0,19 см, появление новых листьев
	Триходерма	Длина листьев 2-2,5 см, стеблей 12 см, стебли устойчивые толщиной 0,12 см, появление новых листьев
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья длиной 4-4,5 см, стебли неустойчивые, самые крупные длиной 15 см, толщиной 0,19 см, не наклонены к свету, появление новых листьев
	Вода	Длина листьев 3 см, размер стеблей около 12 см, стебли устойчивые толщиной 0,1 см
30.03	Бациллус	Крупные листья длиной 3-4 см, толстые и устойчивые стебли размером около 17 см, толщиной 0,3 см, появление новых листьев
	Псевдомона	Длина листьев 2-2,5 см, стеблей 14 см, стебли устойчивые толщиной 0,15 см, появление новых листьев
	Хлорелла	Длина листьев 2,5-3 см стебли прямые, устойчивые длиной 13 см, толщина составляет 0,2 см, появление новых листьев
	Триходерма	Длина листьев 2-3 см, стеблей 12 см, стебли устойчивые толщиной 0,2 см, появление новых листьев
	Дрожжи	Самые крупные из всех листья длиной 4-4,5 см, стебли неустойчивые, длиной 17 см, толщиной 0,2 см, не наклонены к свету, появление новых листьев
	Вода	Длина листьев 3 см, размер стеблей около 13 см, стебли устойчивые толщиной 0,2 см

Фото 24 – Начало эксперимента

Фото 25 – Середина эксперимента

Фото 26 – Конечная стадия эксперимента

Выращивание тимофеевки

День	вода	дрожжи	псевдомона	триходерма	бациллус		хлорелла
11 -15 февраля (начало)	растёт хорошо, ростки не вянут	Растения начинают вянуть Много растений пожелтело, осталось около 50 процентов зелёных	Растут хорошо, Некоторые ростки начинают вянуть и немного желтеть	Растения полегли начали желтеть и сохнуть. В связи с неудачной посадкой			растения растут хорошо, зелёные
21 -28 февраля (середина )	так же зелёные и хорошо растут однако Ростки слегка ложатся	Ещё больше растений пожелтело и повяло, осталось около 20 процентов зелёных	Ростки растут хорошо	Растения выглядят хорошо. В том же состоянии
12 марта- 8 апреля (конец)	Растения немного завяли, Однако вскоре восстановились	Оставшиеся растут хорошо. Растения большие		Растения немного подвяли, оставшихся растут хорошо	Осталось мало ростков, оставшиеся растут хорошо	Растения в хорошем состоянии
		Выглядят хорошо, некоторые опустились	растения растут кучкой, цвет хороший		Растение выглядит вялым немного		Растений много, размер большой

Фото 27 – Конечная стадия

Фото 28 – Посадка Тимофеевки