Практические работы №3,4 Стерилизация и дезинфекция. Асептика и антисептика.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РАБОТЫ № 3,4

СТЕРИЛИЗАЦИЯ И ДЕЗИНФЕКЦИЯ

АСЕПТИКА И АНТИСЕПТИКА

Цель занятия. Изучение понятий и различных способов стерилизации, дезинфекции, антисептики Приготовление рабочих растворов для дезинфекции лабораторной посуды, оборудования, поверхности в помещениях при бактериальных, вирусных и грибковых инфекциях.

Студент должен знать

1.Методы стерилизации и аппаратуру, используемую для этих целей.

2.Методы дезинфекции и антисептики.

Студент должен уметь

1.Применять методы стерилизации, дезинфекции и антисептики.

Материалы и оборудование. Цилиндр, колбы, пипетки. Стерилизатор воздушный ГП-10 МО, автоклав.

Учебник «Основы микробиологии и иммунологии» под редакцией В.В.Зверева, учебное пособие «Микробиология, вирусология и иммунология руководство к лабораторным занятиям» под редакцией В.Б. Сбойчакова, инструкции к дезинфицирующим средствам.

Задание 1

Прочитать теоретический материал темы (электронный учебник стр.51, руководство к лабораторным занятиям стр.92) составить схему (с определениями, примерами) «Понятие о стерилизации и дезинфекции».

Пример фрагмента схемы

Задание 2

Используя текст учебника составьте схему «Виды антисептики».

Задание 3

Заполнить таблицу 1, используя информацию сайта Дезреестр.ру и на основании полученных данных приготовить дезинфицирующий раствор.

Таблица 1 - «Дезинфицирующие средства»

Задание 4

Решение ситуационных задач. Приготовление дезинфицирующих растворов.

Ситуационная задача № 1.

Приготовить 10,5 литров рабочего раствора «Ди - хлор» и провести дезинфекцию лабораторной посуды (пробирки, пипетки, предметные стекла) при бактериальных (кроме туберкулеза) инфекциях.

Ситуационная задача № 2.

Приготовить 12 литров рабочего раствора «Ди - хлор» и провести дезинфекцию поверхностей в помещении и жесткой мебели, режим дезинфекции при туберкулезе, способ орошение распылителем.

Ответы оформите в виде таблицы 2 (в альбомной ориентации).

Задание 5

Произведите расчет компонентов необходимых для приготовления рабочего раствора дезсредства (заполните таблицу 1). Используя полученные расчёты, приготовьте дезраствор.

Таблица 1 – Приготовление дезинфицирующего средства «Аламинол Плюс»

Задание 6

Провести гигиеническую обработку рук по евро стандарту. Правильно одеть и снять СИЗ (перчатки).

Таблица 2 – Решение ситуационных задач

Теоретическая часть

Стерилизация – полное освобождение объектов от микроорганизмов и их спор.

Методы стерилизации:

Стерилизация паровым методом.

Стерилизацию паром под давлением осуществляют в паровых стерилизаторах (автоклавах) при соответствующих режимах:

давление 1,1 атм, температура 120^о С, время стерилизации 45 мин – для изделий из резины, латекса и отдельных полимерных материалов;

давление 2,0 атм, температура 132^о С, время стерилизации 20 мин – для изделий из металла, стекла, изделий из текстильных материалов.

Стерилизацию проводят в стерилизационных коробках (биксах) без фильтров или с фильтром, в двойном слое ткани (бязь, полотно и др.), или в растительном пергаменте.

Для контроля стерильности используют термоиндикаторы: мочевина – температура плавления 132 ^о С, бензойная кислота с фуксином – 120 ^о С; термоиндикаторная лента.

Бактериологический метод контроля стерильности проводят не реже 1 раза в месяц.

Стерилизация воздушным методом. Стерилизацию осуществляют в специальных сухожаровых шкафах.

Хирургический инструментарий, изделия из стекла и силиконовой резины стерилизуют:

температура 180 ^о С в течении 1 часа;

температура 160 ^о С в течении 2 часов.

Стерилизацию проводят в открытых емкостях, биксах и в крафт – пакетах.

Для контроля стерильности применяют термоиндикаторы: тиомочевина – температура

плавления 170 ^о С, сахароза с винной кислотой. Бакконтроль не реже 1 раза в месяц.

Стерилизация прокаливанием. На огне спиртовки при температуре до 400⁰С стерилизуют бактериологические петли, иглы.

Стерилизация химическим методом. Под химической стерилизацией (холодной) понимают стерилизацию химическими веществами, в виде растворов и газов.

Стерилизацию изделий из полимерных материалов, резины, стекла, коррозионностойких металлов проводят:

6% раствором перекиси водорода при температуре 18 о С в течении 6 часов и при

температуре раствора 50 ^оС – 3 часа;

1% р-ром Дезоксон-1 при температуре 18 ^оС – 45 мин;

2,5% раствором глютаминового альдегида (фирма «REANAL») при температуре 18

оС – 6 часов;

Раствором «Сайдекса» при температуре 21 ^оС для полимеров (эндоскопов) – 10

часов, для металла – 4 часа.

4,8% раствором первомура при температуре 18-20 ^оС – 20 мин (шовный материал и

резиновые изделия).

Изделия полностью погружаются в стерилизационный раствор с заполнением всех имеющихся ходов и каналов. После окончания стерилизационной выдержки изделия извлекают из раствора стерильными корнцангами, помещают в стерильную емкость и промывают дважды дистиллированной водой. Затем высушиваются с помощью салфеток или на стерильной простыне (стерильный стол, бикс).

Стерилизацию и промывание проводят в асептических условиях, соотверствующих требованиям, предъявляемых к чистым операционным.

Стерилизация хирургических инструментов.

Алгоритм практической манипуляции по хирургии. Инструменты комплектуются на определенный вид операции и стерилизуются одним из способов:

1.Автоклавирование: давление1,5-2 атм, температура 132°,время выдержки 20 минут – в биксах или мягкой упаковке.

2.Сухим жаром : температура 180° - 60 минут; в биксах или открытых емкостях.

3.Холодным способом (6% перекись водорода, Дезаксон-1, «Сайдекс»)

Стерилизация зондов, резиновых изделий.

Зонды, трубки сворачивают кольцами без перегибов.

Перчатки проверяют на целостность. Пересыпают тальком внутри и снаружи. Каждую перчатку в отдельности и попарно заворачивают в марлевые салфетки, между пальцами прокладывают марлю в 1-2 слоя, укладывают в бикс и стерилизуют.

1 Автоклавирование: давление1 атм, температура 120° - 45 минут.

2 Холодным способом (6% перекись водорода, Дезоксон-1; 4,8% р-р первомура)

Стерилизация наркозно-дыхательной аппаратуры.

1.Холодная стерилизация (6% перекись водорода, «Сайдекс»)

Стерилизация эндоскопов.

1.Холодная стерилизация (глютаминовый альдегид, «Сайдекс»).

2.Газовая стерилизация. В специальных стерилизаторах (парофармалиновых камерах) парами формалина в течении 24 часов, после чего обеззараженные изделия берут стерильными инструментами, помещают в стерильный тазик, промывают дистиллированной водой и укладывают на стерильный стол.

Стерилизация шовного материала (шелк, капрон).

1.Автоклавирование : лигатурный шовный материал заворачивают в 2 слоя упаковочного материала, помещают в бикс (видовая укладка) и стерилсзуют основным режимом. Простерилизованный шовный материал перекладывают в стерильные банки и заливают 96% спиртом, который меняют каждые 10 дней.

2.Холодная стерилизация : в 4,8% р-р первомура на 15 мин. По окончании стерилизационной выдержки шовный материал для отмывания от стерилизующего раствора стерильным пинцетом в асептических условиях переносят последовательно в 2 стерильные емкости с физ.раствором, выдерживая в каждой по 5 мин. Затем шовный материал помещают в стерильную емкость.

3. Стерилизация раствором хлоргексидина биглюконата .

Из шелка, капрона готовят катушки и для обезжиривания их заливают эфиром на 2 суток.

Извлекают стерильными инструментами и перекладывают в стерильную банку, заливают 1% водным р-ром хлогексидина на 30 мин.

После этого катушки переносят в 2,5% р-р хлоргексидина на 5 мин.

Затем перекладывают в стерильные банки и заливают 96% спиртом на 3 суток.

Хранят шовный материал в 96% спирте, который меняют каждые 10 дней.

Бактериологический контроль каждые 10 дней.

Стерилизация шовного материала (кетгут).

Стерилизация в спиртовом р-ре Люголя .

Кетгут в моточках заливают эфиром на 1 сутки для обезжиривания.

Затем эфир сливают и заливают на 8-10 суток спиртовым р-ром Люголя.

Затем р-р сливают и заливают свежим, еще на 8-10 суток.

На 16-20 сутки после начала стерилизации кетгут подвергают бактериальной проверке и его используют.

Хранят кетгут в спирте, который меняют каждые 10 дней.

Бакконтроль каждые 10 дней.

Стерилизация белья и перевязочного материала.

Перевязочный материал и белье стерилизуется автоклавированием, применяя основной режим, в биксах.

Стерилизация ионизирующим излучением. Гамма – лучами и энергией ускоренных электронов стерилизуют объекты, разрушающиеся при действии высоких температур: изделия из полимерных материалов (одноразовые шприцы, катетеры, системы для внутривенных вливаний), некоторые лекарственные средства и шовный материал.

Механический способ стерилизации (фильтрацию) применяют для обработки жидкостей, совершенно не выдерживающих нагревания (питательных средств, лекарственных веществ), а также для очистки бактериальных токсинов, бактериофагов от бактерий. Для этого используют мембранные фильтры, диаметр пор которых меньше размера бактериальных клеток.

Лучевая, химическая стерилизация и фильтрование являются методами холодной стерилизации.

Дезинфекция – комплекс мероприятий, направленных на уничтожение во внешней среде не всех микроорганизмов, а только определенных возбудителей инфекционных заболеваний.

Дезинфекция направлена на разрыв цепочки инфекционного (эпидемического) процесса, ограничивая функционирование одного из его основных звеньев — возбудителя заболевания. Она производится с помощью физических и химических методов.

Когда возможно, нужно использовать физические методы дезинфекции, поскольку они более надежны, легче контролируются, нетоксичны.

Цель дезинфекции — уничтожение патогенных и условно-патогенных микроорганизмов на объектах внешней среды палат и функциональных помещений отделений ЛПУ, на медицинском оборудовании и инструментарии.

При некоторых ВБИ (ГСИ, кишечные инфекции) дезинфекция является практически единственным способом снижения заболеваемости в ЛПУ.

З а п о м н и т е ! Все госпитальные штаммы возбудителей ВБИ обладают значительной устойчивостью к воздействию обычных рабочих растворов дезинфицирующих средств.

Использование для очаговой дезинфекции растворов более низкой концентрации, чем указано в методических указаниях, ведет к появлению в стационарах еще более устойчивых к внешним воздействиям госпитальных штаммов.

Виды дезинфекции:

1.Профилактическая

2.Очаговая

3.Текущая

4.Заключительная

Тактика и способы профилактической и очаговой дезинфекции существенно отличаются.

«..Следует помнить, что дезинфекция проводится с учетом эпидемической опасности и значимости ряда предметов и оборудования как предполагаемых факторов риска в реализации того или иного механизма передачи ВБИ.»

Чтобы дезинфекция была эффективной, нужно знать назначение средств и методов дезинфекции, способы и режимы их применения для обеззараживания объектов, рекомендуемую для этих целей аппаратуру и приборы, особенности обеззараживаемых объектов, способы защиты персонала, проводящего дезинфекцию, и находящихся в помещении пациентов.

Различают механические, физические и химические способы дезинфекции.

Механическая дезинфекция приводит к значительному уменьшению количества патогенных микроорганизмов, однако не позволяет достигнуть полного обеззараживания обрабатываемых объектов. Механическую дезинфекцию осуществляют путем встряхивания, влажной уборки, вентиляции помещений и т.д.

Физические способы дезинфекции: высушивание, воздействие высокой температурой (сжигание, прокаливание, кипячение), пар, горячий воздух, ультрафиолетовое облучение и др.

При ультрафиолетовом облучении антимикробное действие обеспечивается УФ-лучами, исходящими от специальных настенных, потолочных, переносных и передвижных бактерицидных ультрафиолетовых установок. Их используют с целью снижения микробной обсемененности воздуха и поверхностей различных объектов ЛПУ.

Сухой горячий воздух при температуре более 100°С изменяет органические вещества, растительные и животные волокна, а свыше 170°С — обугливает их. Он оказывает бактерицидное, вирулицидное, фунгицидное, спороцидное и инсектицидное действие.

Сухой горячий воздух (160°-180°С) применяют в воздушных стерилизаторах, камерах и аппаратах для дезинфекции посуды, инструментов, изделий медицинского назначения из металла, стекла, силиконовой резины, а в камерах при температуре 80-100°С — для дезинсекции одежды, постельных принадлежностей и других вещей.

Водяной пар проникает вглубь обрабатываемых объектов, оказывает сильное антимикробное действие: вегетативные формы патогенных и условно-патогенных микроорганизмов погибают от воздействия пара при температуре 80°С, а споровые формы при температуре 120°С в течение 10 мин. Водяной насыщенный пар под давлением используют в дезинфекционных камерах для обеззараживания одежды, постельных принадлежностей, а в паровых стерилизаторах для дезинфекции аптечной и лабораторной посуды, изделий медицинского назначения и предметов ухода из стекла, коррозионностойкого металла, изделий из текстильных материалов, резины, латекса и отдельных полимерных материалов.

Горячая вода (60-100°С) оказывает антимикробное действие в отношении многих микроорганизмов, вегетативные формы которых погибают в течение 30 мин. Горячую воду с добавлением моющих средств используют для механического удаления загрязнений и микроорганизмов при стирке белья, мытье посуды, уборке. Кипячение в воде при температуре 80°С в течение 15-45 мин применяют для обеззараживания белья, посуды, инструментов, изделий медицинского назначения, предметов ухода за больными, игрушек и других объектов. При добавлении в воду 2-процентного раствора натрия гидрокарбоната антимикробное действие кипячения усиливается.

При соблюдении всех условий данный метод обеспечивает дезинфекцию высокого уровня.

Оборудованием инструментарий должны быть тщательно очищены, положены в контейнер и запиты водой. Вода нагревается до кипения. Дезинфекция начинается с момента закипания и продолжается 5 мин. Для предупреждения коррозии в воду добавляется 2-процентный раствор натрия бикарбоната. Использованные инструменты необходимо прокипятить или обработать в паровом стерилизаторе и высушить в течение дня. После кипячения воду из кипятильника слить и вытереть его насухо.

Оборудование, которое разрушается в результате кипячения, дезинфицируют в течение 5 мин при температуре 80°С. При этом должна быть обеспечена возможность точной регулировки температуры воды в кипятильнике.

Дезинфекция кипящей водой белья, постельных принадлежностей, столовых приборов, лабораторной стеклянной посуды и инструментов перед стерилизацией в паровом стерилизаторе возможна в некоторых типах моечных машин.

Максимальная эффективность достигается при использовании машин, в которых процессы очистки, кипячения и сушки совмещены и происходят последовательно. В этих машинах для обработки инструментов технологический цикл начинается с ополаскивания и мытья инструментов. На этом этапе удаляется большинство микроорганизмов, что позволяет сократить время дезинфекции (1 мин — 80-85°С, 3 мин — 70°С, 10 мин — 93°С).

Уровень достигаемой дезинфекции (высокий или низкий) зависит от типа машины и комплекса условий.

Химические средства дезинфекции составляют 7 групп. Химические средства применяются в основном для дезинфекции термолабильного оборудования многократного применения. Например, эндоскопические приборы требуют химической дезинфекции высокого уровня.

После химической дезинфекции оборудование необходимо промыть стерильной водой. При ее отсутствии используют свежекипяченую воду. После ополаскивания оборудование хранят в сухом виде и предохраняют от инфицирования.

Дезинфекцию громоздкого оборудования проводят методом протирания поверхности ветошью, смоченной дезинфицирующим средством, и последующим просушиванием.

На чистых поверхностях можно применять 70-процентный этиловый спирт, в этом случае сушить поверхность необязательно.

Группы средств дезинфекции:

1. Хлорсодержащие

2. Кислородосодержащие

3. ПАВ (поверхностно-активные вещества)

4. Гуанидины

5. Альдегидсодержащие

6. Спирты

7. Фенолсодержащие

Меры предосторожности при работе с дезинфицирующими средствами

1. «Используемые для дезинфекции, предстерилизационной обработки и стерилизации химические препараты обладают в различной степени местным и резорбтивным токсическим действием.

2. К работе с дезинфицирующими препаратами допускаются лица, не моложе 18 лет, прошедшие соответствующий инструктаж по обязанностям, технике безопасности, мерам предосторожности и профилактике случайных отравлений, утвержденным соответствующими Правилами.

3. Лица с повышенной чувствительностью к применяемым химическим средствам от работы с ними отстраняются.

4. Замачивание белья, посуды и других предметов в растворах дезинфицирующих средств, предстерилизационную обработку и стерилизацию изделий медицинского назначения химическими средствами, обработку пациентов и их вещей инсектицидами проводят в специальных помещениях, оборудованных приточно- вытяжной вентиляцией.

5. Приготовление рабочих растворов дезинфицирующих средств проводят в хорошо проветриваемых помещениях. Хранят растворы и выдерживают в них обрабатываемые объекты в плотно закрывающихся емкостях. Запасы препаратов хранят в местах, недоступных для общего пользования, в темной посуде, в сухом, темном и прохладном помещении. Все дезинфекционные средства и растворы должны иметь этикетки с указанием названия, концентрации, даты изготовления и срока годности.

В отделениях дезинфицирующие средства и их растворы хранят под замком в местах, недоступных для детей и лиц, не занимающихся дезинфекцией, отдельно от лекарственных препаратов.

6. Строго соблюдают последовательность и точно выполняют все этапы очистки и дезинфекции, обеспечивающие максимальное удаление с обрабатываемых объектов остатков моющих и дезинфицирующих средств.

7. Всю работу с дезинфицирующими, стерилизующими химическими средствами и инсектицидами проводят в хорошо проветриваемых помещениях, в спецодежде, перчатках ПХВ, герметичных очках (ПО-2, ПО-3) и в универсальных респираторах (РУ-60М и др.).

(Меры предосторожности при работе с конкретным дезинфицирующим средством указаны в «Методических указаниях» по применению препарата).

8. После окончания работы руки моют и смазывают смягчающим кремом.

9. При проведении дезинфекции необходимо строго соблюдать режимы дезобработок (концентрацию рабочих растворов дезинфицирующих средств, нормы их расхода, время дезинфекционной выдержки) с целью профилактики возможного неблагоприятного воздействия дезинфицирующих средств на организм персонала и пациентов».

З а п о м н и т е! Способы и средства дезинфекции регламентируются действующими нормативными документами.