Практическая работа №1 Знакомство с микробиологической лабораторией. Изучение морфологии микроорганизмов.

ВВОДНЫЙ ИНСТРУКТАЖ СТУДЕНТОВ

ПРАВИЛА ТЕХНИКИ БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ В МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЯХ

1. Работа в лаборатории ведется исключительно в халатах и сменной обуви или бахилах.

2. Верхняя одежда и сумки не должны находиться в лаборатории.

3. Запрещается принимать пищу и пить воду в лаборатории.

4. Работу с биологическим материалом проводить только предварительно обработанным инструментом.

5. При случайном попадании биологического материала на стол, руки или другие поверхности необходимо сразу же оповестить об этом преподавателя и провести обработку загрязненной поверхности дезинфицирующим раствором.

6. После работы необходимо тщательно вымыть руки с использованием дезинфекционных средств.

7. Рабочее место следует поддерживать в чистоте, не загромождать его посудой и лишними вещами.

8. Студентам запрещается работать в лаборатории в отсутствие преподавателя или лаборанта, а также в неустановленное время без разрешения преподавателя.

9. К выполнению каждой лабораторной работы нужно приступать только после получения инструктажа по технике безопасности, ознакомления с методиками и разрешения преподавателя.

10. Лабораторную работу необходимо проводить в точном соответствии с описанием в методических указаниях.

11. Для проведения работы пользоваться только чистой, сухой лабораторной посудой; для отбора объемов реактивов нужно иметь мерную посуду (пипетки, бюретки, мензурку, мерный цилиндр или мерный стакан); нельзя выливать избыток налитого в пробирку реактива обратно в емкость.

12. Если в ходе опыта требуется нагревание, надо следовать предусмотренным методическими указаниями способам нагрева: на водяной бане, на электроплитке или на спиртовке.

13. Нагревание предметного стекла в пламени спиртовки при приготовлении некоторых препаратов следует проводить равномерно.

14. Запрещается работать с неисправными электроприборами. О любых неисправностях следует незамедлительно информировать преподавателя.

15. По окончании работы следует привести в порядок свое рабочее место: помыть посуду, протереть поверхность рабочего лабораторного стола, закрыть водопроводные краны, выключить электрические приборы.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА №1

ЗНАКОМСТВО С МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИЕЙ.

ИЗУЧЕНИЕ МОРФОЛОГИИ МИКРООРГАНИЗМОВ

Цель занятия. Ознакомление с устройством микробиологических лабораторий, изучение правил работы в них. Изучение морфологии бактерий.

Материалы и оборудование. Оборудование, входящее в перечень бактериологических лабораторий. Комплект микроскопов. Готовые микроскопические материалы различных форм бактерий. Учебник основы микробиологии и иммунологии, под редакцией В.В. Зверева.

Студент должен знать

1. Группы микроорганизмов по степени биологической опасности (патогенности).

2. Принципы организации микробиологической лаборатории.

3. Правила работы в микробиологической лаборатории.

4. Формы бактериальных клеток и основные морфологические типы бактерий.

Студент должен уметь

1. Содержать рабочее место в порядке.

2. Дифференцировать бактерии по морфологическим признакам.

Задание 1. Составьте схему «Классификация микробиологических лабораторий». В схеме обязательно напишите определение микробиологическая лаборатория.

Задание 2. Прочитайте текст электронного учебника стр.24 (печатное издание стр.43) или теоретическую часть работы, запишите классификацию микроорганизмов по степени их биологической опасности, указав примеры инфекций.

Задание 3. Прочитайте и запомните правила работы в микробиологической лаборатории.

Задание 4. Просмотрите схему микробиологической лаборатории (рис.1). На рисунке обозначены разными цветами «чистая» и «заразная» («грязная») зоны лаборатории. Подумайте почему их так называют? Запишите в тетрадь определения «чистая» и «заразная» зона.

Задание 5. Используя текст учебника или теоретический материал темы, составьте схему «Удаление лабораторных отходов»

Задание 6. Повторите морфологические и тинкториальные свойства бактерий (лекция, электронный учебник стр.12, приложение 1). Зарисовать и писать готовые микропрепараты (перечислить микроорганизмы на фото или готовых микропрепаратах определив их по форме и цвету (окраска по Граму). Ответы оформить в таблицу.

Пример микропрепарата

Теоретический материал

Микробиологическая лаборатория – это специализированная профессиональная организация, ориентированная на осуществление исследовательских лабораторных работ (рисунок 1).

В медицинских микробиологических лабораториях изучаются — патогенные биологические агенты — вирусы, бактерии, грибы, простейшие, яды биологического происхождения (токсины), гельминты, а также материал (включая кровь, биологические жидкости и экскременты организма человека), подозрительный на содержание патогенных микроорганизмов.

Рисунок 1 – План-схема микробиологической лаборатории

«Грязная» («заразная») зона включает (справа на рисунке, обозначена красным цветом): помещения для приёма и регистрации материала, помещения для проведения исследований, термостатная, автоклавная для обеззараживания материала. «Чистая» зона (слева на рисунке, обозначена зеленым цветом) включает: гардероб, комнаты отдыха, комнату для работы с документацией, комнату для надевания рабочей одежды, подсобные помещения (помещения для приготовления питательных сред, моечная, стерилизационная), душевую и туалет, стерилизационную.

В зависимости от выполняемых исследований микробиологические лаборатории подразделяют на:

• диагностические

• производственные

• научно-исследовательские

В зависимости от уровня безопасности работы с микроорганизмами лаборатории подразделяют на четыре группы риска.

• Первая группа риска: лаборатории особого режима (максимально изолированные) с высоким индивидуальным и общественным риском.

• Вторая группа риска: режимные лаборатории (изолированные) с высоким индивидуальным и низким общественным риском (рисунок 2).

Рисунок 2 – Режимная лаборатория

• Третья группа риска: базовые (основные) лаборатории с умеренным индивидуальным и ограниченным общественным риском.

• Четвёртая группа риска: базовые (основные) лаборатории с низким индивидуальным и общественным риском.

Рисунок 3 – Основная лаборатория

Большая часть лабораторий работает с III и IV группами, а изучением возбудителей особо опасных инфекций (группы I и II) занимаются только специализированные лаборатории.

Группы возбудителей инфекционных заболеваний по степени биологической опасности:

• Группа I: возбудители особо опасных инфекций (чума, натуральная оспа, желтая лихорадка и др.).

• Группа II: возбудители высокозаразных (высококонтагиозных) инфекций (сибирская язва, бруцеллеза, малярии, сыпного тифа и др.).

• Группа III: возбудители инфекций, выделенные в отдельные формы (возбудители брюшного тифа, коклюша, шигеллеза, дифтерии, полиомиелита и др.).

• Группа IV: возбудители условно патогенных инфекций (стрептококки, стафилококки), возбудители оппортунистических инфекций (клебсиеллы, протей).

Правила работы в микробиологической лаборатории

1. Работу в лаборатории осуществляют только в халате и шапочке

2. Не допускаются излишние разговоры и перемещения по лаборатории

3. Каждый сотрудник имеет постоянное рабочее место, где выполняет основную работу

4. Запрещается прием пищи и курение

5. При работе с заразным материалом необходимо пользоваться инструментами (бактериальными петлями, пинцетами, шпателями и т. д.) не прикасаясь к ним руками

6. Весь контаминированный материал, посуда, инструменты должны быть обязательно обеззаражены

7. При работе с пипетками необходимо пользоваться резиновой грушей или пиппетатором (дозатор)

8. Работу с микроорганизмами производят только вблизи зажженной горелки, при этом обязательно обжигают края пробирок, петли, шпатели и т.д. зажигают горелку спичкой, гасят – накрывая колпачком. Нельзя переносить зажженную горелку с места на место, необходимо сначала потушить горелку, а на новом месте зажечь заново.

9. Если заразный материал попал на окружающие предметы, необходимо провести обработку этого участка дезинфицирующим раствором

10. После работы необходимо протереть иммерсионный объектив, привести микроскоп в нерабочее положение и вымыть руки.

Рисунок 4 – Работа в микробиологической лаборатории

Оборудование микробиологической лаборатории

1. Микроскопы — оптические, люминесцентные, осветительные приборы.

2. Термостаты, в которых автоматически поддерживается температура, оптимальная для выращивания микроорганизмов в диапазоне от 28 до 43С.

3. Электрический сушильный шкаф и автоклав, предназначенные для стерилизации лабораторной посуды, питательных сред и спецодежды.

4. Холодильники и морозильные камеры, используемые для хранения питательных сред, музейных бактериальных культур, биопрепаратов, а также исследуемого материала.

5. Центрифуги, предназначенные для осаждения микроорганизмов, эритроцитов, для отделения прозрачного экстракта из исследуемого продукта.

6. Дистиллятор, необходимый для получения дистиллированной воды, на которой готовят физиологический раствор, питательные среды, рабочие растворы красок;

7. Автоматические водяные бани используют для подогрева питательных сред, аналитические и торсионные весы нужны для взвешивания, например, компонентов питательной среды.

8. Лабораторная посуда: колбы, бактериологические пробирки, чашки Петри, автоматические пипетки, стеклянные градуированные и пастеровские пипетки, мерные цилиндры.

Мелкие металлические инструменты: бактериологические петли и иглы, шпатели (используют для посева и пересева микроорганизмов), пинцеты, скальпели, ножницы.

Удаление лабораторных отходов имеет следующие цели:

• минимизацию опасности при обращении, сборе, транспортировании, переработке и удалении отходов;

• минимизацию вредного воздействия на окружающую среду.

Обеззараживание и удаление отходов микробиологической лаборатории проводят согласно санитарно-эпидемиологическим правилам и нормативам - СанПиН 2.1.7.2790-10, по которым отходы микробиологических лабораторий относятся к группам Б (эпидемически опасным) и В (эпидемически особо опасным).

Все отработанные пробы, бактериальные культуры помещают в маркированные контейнеры, предназначенные для удаления опасных отходов (рисунок 5).

Рисунок 5 – Классы медицинских отходов

Отходы микробиологической лаборатории подлежат обязательному обеззараживанию и удалению. Схема утилизации медицинских отходов представлена на рисунке 6.

Рисунок 6 – Схема утилизации медицинских отходов

Таблица 1 – Классификация медицинских отходов

Приложение 1

Морфологические и тинкториальные свойства бактерий. Некоторые бактерии образуют споры, расположенные центрально (1), субтерминально (2) или терминально (3).